北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
自1949年發(fā)現(xiàn)抗生素對動物具有促生長作用以來,抗生素在畜牧業(yè)中的應(yīng)用已有約70年的歷史。實(shí)踐證明抗生素對保障動物健康、促進(jìn)動物生長、提高飼料利用率確實(shí)具有明顯效果。但隨著抗生素的不合理使用造成的耐藥性和殘留問題日益嚴(yán)重,越來越多的國家開始禁止使用飼用抗生素。1986年瑞典宣布全面禁止飼用抗生素,成為首個(gè)禁用飼用抗生素的國家。隨后歐盟于2006年起全面禁止在飼料中使用抗生素。2019年7月10日,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布了第194號公告要求除中藥類外的所有促生長類藥物飼料添加劑在2020年底前全部退出。12月26日農(nóng)業(yè)農(nóng)村部又發(fā)布了第246號公告稱自2020年1月1日起廢止僅有促生長用途的藥物飼料添加劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),在飼料端“禁抗”、養(yǎng)殖端“減抗、限抗”已成必然趨勢。尋求安全有效的抗生素替代品,是我國畜牧業(yè)當(dāng)前面臨的緊迫任務(wù)。益生菌、抗菌肽、植物提取物、酸化劑、精油、酶制劑和功能性寡糖等都是目前熱門的替抗產(chǎn)品。
在這些替抗產(chǎn)品中,益生菌以其綠色安全、效果確切在抗生素替代方面承擔(dān)著重要的角色。乳酸菌是一類能夠代謝產(chǎn)生有機(jī)酸、細(xì)菌素和多種有益代謝產(chǎn)物的益生菌。在動物日糧中添加活性乳酸菌具有調(diào)節(jié)動物腸道菌群平衡、提高動物免疫力、減少動物腹瀉、保障動物健康的功效,是替抗產(chǎn)品的中堅(jiān)力量。但乳酸菌應(yīng)用最大的問題是耐高溫和耐儲存性能較差,在飼料高溫制粒和儲存過程中極易失活,使大多數(shù)活菌無法進(jìn)入動物腸道發(fā)揮作用,極大降低了乳酸菌的飼用價(jià)值。將乳酸菌發(fā)酵完成以后采用特殊的工藝將其滅活,完整保留乳酸菌在生長過程中的各種有益代謝產(chǎn)物和死菌體制成滅活乳酸菌,有效解決了乳酸菌在高溫制粒和儲存過程中的活性損失問題。研究表明滅活乳酸菌同活性乳酸菌一樣具有維持動物腸道健康,促進(jìn)動物生長,調(diào)節(jié)動物機(jī)體免疫力,提高飼料利用率的功能,只是兩者發(fā)揮效用的作用機(jī)理有所不同。
1活性乳酸菌的作用機(jī)理
乳酸菌是一類能夠發(fā)酵碳水化合物產(chǎn)生大量乳酸的無芽孢革蘭氏陽性菌的統(tǒng)稱,厭氧或兼性厭氧,在無氧條件下生長更好,在pH3.0~4.5的酸性條件下能夠生存,不耐熱?;钚匀樗峋饕ㄟ^競爭性粘附作用及其代謝產(chǎn)生的有機(jī)酸、細(xì)菌素等抑菌物質(zhì),抑制和殺滅腸道有害菌,調(diào)節(jié)腸道菌群平衡通過菌體及其活性成分肽聚糖、脂多糖、脂磷壁酸和代謝產(chǎn)生的胞外多糖等物質(zhì),調(diào)節(jié)動物機(jī)體免疫水平,維持動物健康。
1.1競爭性粘附作用
乳酸菌是動物腸道內(nèi)的優(yōu)勢菌群,屬于腸道共生菌,對抵御外來致病菌的入侵和維持動物消化道內(nèi)菌群平衡具有重要作用。乳酸菌對腸道粘膜的粘附是其發(fā)揮益生功能的前提條件,是影響乳酸菌飼用效果的關(guān)鍵因素。乳酸菌依靠其細(xì)胞表面具有粘附能力的完整肽聚糖、脂磷壁酸、表面粘附蛋白和胞外多糖等粘附素與腸粘膜上皮細(xì)胞和腸道粘液中的粘附素受體進(jìn)行特異性和非特異性結(jié)合,使其能夠大量牢固地定植在動物腸粘膜表面,形成一層菌膜,發(fā)揮生物屏障作用,在空間上阻礙致病菌與腸粘膜的接觸和粘附,抑制病原菌的定植,并通過其代謝產(chǎn)物抑殺致病菌,保護(hù)動物腸道健康。乳酸菌通過與致病菌競爭腸粘膜上的結(jié)合位點(diǎn)和生存空間,在動物腸道內(nèi)定植和生長發(fā)揮其生物學(xué)功能。
1.2產(chǎn)生有機(jī)酸
乳酸菌在腸道內(nèi)生長繁殖過程中會產(chǎn)生大量乳酸等有機(jī)酸,有機(jī)酸的持續(xù)積累能夠降低腸道pH值和氧化還原電位,利于腸道形成酸性環(huán)境,優(yōu)化腸道有益菌的生存環(huán)境,抑制嗜堿性有害菌的生長和增殖,降低有害菌的感染率,維持腸道微生態(tài)平衡和腸道的正常功能。有機(jī)酸能夠促進(jìn)腸道蠕動,增加糞便含水量,潤腸通便,同時(shí)為動物腸道提供適宜的消化吸收環(huán)境,有利于營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,提高飼料利用率,增進(jìn)動物健康,減少疾病發(fā)生。乳酸菌代謝產(chǎn)生的苯乳酸具有較寬的抑菌譜,可有效抑制革蘭氏陰性菌、陽性菌和真菌的生長。
1.3產(chǎn)生乳酸菌細(xì)菌素
絕大多數(shù)乳酸菌在生長代謝過程中會產(chǎn)生具有抑菌活性的肽類物質(zhì),稱成乳酸菌細(xì)菌素或乳酸菌素。細(xì)菌素是乳酸菌在代謝過程中通過核糖體合成的具有抑菌活性的多肽或蛋白質(zhì)類物質(zhì),對熱穩(wěn)定。細(xì)菌素可選擇性抑制或殺死腸道內(nèi)的病原菌,而對乳酸菌自身不起作用。根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)、穩(wěn)定性和分子量大小的不同,通常將乳酸菌細(xì)菌素分為四類:羊毛硫抗生素(Ⅰ)、肽類乳酸菌素(Ⅱ)、蛋白類乳酸菌素(Ⅲ)和復(fù)合型乳酸菌素(Ⅳ)。細(xì)菌素作用的靶細(xì)胞是致病菌的細(xì)胞膜。細(xì)菌素通常先結(jié)合到致病菌細(xì)胞表面上的特異性受體或非特異性受體上,然后再嵌入到質(zhì)膜內(nèi)部后,開始聚集形成寡聚體結(jié)構(gòu),最終在質(zhì)膜上形成膜孔,通過形成膜通透孔道引起致病菌細(xì)胞內(nèi)重要物質(zhì)的流失而達(dá)到殺菌目的。乳酸菌細(xì)菌素一般對革蘭氏陽性致病菌的抑菌效果更好。
1.4產(chǎn)生乳酸菌胞外多糖
胞外多糖是微生物在生長過程中分泌到細(xì)胞壁外的長鏈多糖,通常分為莢膜多糖和粘液多糖。莢膜多糖是指疏松地附著在細(xì)菌表面的多糖,粘液多糖則是以粘液的形式完全分泌到胞外環(huán)境中的多糖。乳酸菌胞外多糖是乳酸菌在生長代謝過程中分泌到細(xì)胞壁外滲透在發(fā)酵底物中的糖類化合物,分為同型多糖和異型多糖。同型多糖是只包含一種類型單糖的多糖物質(zhì)。異型多糖也稱雜多糖,是由幾種不同類型的單糖組成的多糖物質(zhì)。乳酸菌胞外多糖能夠促進(jìn)乳酸菌與腸道粘膜的粘附,在乳酸菌菌體與腸粘膜的粘液層接觸及粘附過程中發(fā)揮重要作用。乳酸菌胞外多糖能夠選擇性促進(jìn)腸道有益菌的增殖,作為能源物質(zhì)為腸道有益菌提供營養(yǎng)。乳酸菌胞外多糖具有免疫調(diào)節(jié)活性,能夠提高動物機(jī)體的免疫應(yīng)答,是一種免疫調(diào)節(jié)劑。胞外多糖能夠激活巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞的活性,促進(jìn)細(xì)胞的吞噬能力,調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞因子的分泌,增強(qiáng)機(jī)體特異性和非特異性免疫應(yīng)答反應(yīng),提高動物免疫力。
1.5乳酸菌的免疫調(diào)節(jié)作用
乳酸菌對動物機(jī)體的免疫具有重要的調(diào)節(jié)作用。菌體和菌體細(xì)胞壁是乳酸菌發(fā)揮免疫激活作用的主要活性成分。乳酸菌通過其菌體以及細(xì)胞壁成分肽聚糖、脂多糖、脂磷壁酸和乳酸菌細(xì)胞DNA等多種活性成分提供免疫信號,激活巨噬細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的活性和增加腸道中IgA水平,激活機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫等特異性免疫反應(yīng)。乳酸菌也是良好的非特異性免疫增強(qiáng)劑,能夠提高機(jī)體的非特異性免疫水平。
1.6吸附霉菌毒素
霉菌毒素是霉菌在生長過程中產(chǎn)生的有毒有害代謝產(chǎn)物,通過飼料進(jìn)入動物體內(nèi)對動物的健康產(chǎn)生嚴(yán)重危害。乳酸菌的代謝產(chǎn)物能夠抑制霉菌的生長,從而抑制霉菌毒素的產(chǎn)生?;钚匀樗峋募?xì)胞壁具有吸附霉菌毒素的能力。乳酸菌通過細(xì)胞壁中的多糖、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)成分,利用離子交換作用與霉菌毒素結(jié)合,吸附霉菌毒素,并將霉菌毒素一起隨糞便排出體外,降低和減少霉菌毒素對動物的侵害。
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