桃膠是樹木受損位置的黏性液體，在干燥的空氣中長(zhǎng)時(shí)間的暴露，形成后的玻璃透明材料，通常是淡黃色或棕色。桃膠主要成分是多糖和蛋白質(zhì)。桃膠多糖是中藥的重要活性成分，具有多種生物活性和保健功能，可以降低糖尿病患者的血糖水平，調(diào)節(jié)血脂異常。此外，桃膠多糖在農(nóng)業(yè)、工業(yè)、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域都有廣泛的運(yùn)用。

隨著桃膠多糖應(yīng)用的增加，桃膠多糖的提取方法也引起了研究者們的關(guān)注。水提醇沉法是植物多糖的傳統(tǒng)提取方法，但由于桃膠膠體難溶于水，黏度很大，使多糖難以擴(kuò)散。因此，采用傳統(tǒng)方法提取桃膠多糖的提取率低。超聲輔助萃取技術(shù)具有簡(jiǎn)便快速、高效節(jié)能、重復(fù)性好、不影響提取物的活性等諸多優(yōu)點(diǎn)。丁成麗等將其應(yīng)用于桃膠多糖的提取，提取效率為81.44％。此外，微波具有穿透力強(qiáng)、選擇性高、加熱效率高等特點(diǎn)，微波輔助萃取技術(shù)也被應(yīng)用于植物多糖的萃取。唐黎標(biāo)將微波輔助萃取技術(shù)應(yīng)用于桃膠中多糖的提取，提取效率為74.7％。如上所述，利用超聲或者微波的方法提取桃膠中的多糖已見報(bào)道，但尚未見到利用超聲微波協(xié)同萃取技術(shù)提取桃膠中多糖的報(bào)道。因此，本文將微波和超聲輔助提取技術(shù)相結(jié)合，探討了浙江奉化地區(qū)的桃膠多糖的提取工藝，取得了較好的結(jié)果。

一、材料與方法

1、材料與儀器

XH一300UL微波超聲波紫外光組合催化合成儀：北京祥鵠科技發(fā)展有限公司；W—2Q1B恒溫水浴鍋：鄭州科泰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；ModelZD一2pH計(jì)：上海精密科學(xué)儀器有限公司；TU一1950紫外可見分光光度計(jì)：北京普析通用儀器有限責(zé)任公；DT5—2A離心機(jī)：北京時(shí)代北利離心機(jī)有限公司；桃膠購(gòu)于浙江奉化；其余試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

2、桃膠多糖的提取

（1）桃膠原膠的預(yù)處理

將桃膠原膠置于冷水浸泡24h潤(rùn)漲，用清水反復(fù)沖洗。取洗凈的原膠，放入真空干燥箱，80℃干燥，然后用多用植物粉碎機(jī)粉碎，粉碎后使用80目篩網(wǎng)多次的過濾獲得桃膠粉末。

（2）桃膠多糖的提取

以表2中1號(hào)實(shí)驗(yàn)為例，稱取處理后桃膠粉末1g，加入50倍蒸餾水，在60℃、4h攪拌提取多糖粗糖后，在微波功率400W和超聲功率70W的同時(shí)作用下，提取10min，重復(fù)兩次。離心得到上清液，加入10mL 6mol/LHCl，然后把上清液倒入燒杯，沸水浴水解0.5h。冷卻后，用氫氧化鈉固體中和至中性。過濾后，加水進(jìn)行稀釋，得到多糖稀釋水解液。

3、桃膠多糖含量測(cè)定及方法

用木糖作為多糖測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)品，再通過3，5-二硝基水楊酸（DNS）比色法測(cè)定溶液中多糖的含量。

（1）標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制

稱取100mg的木糖，置于100mL容量瓶中，加水溶解至刻度，即得木糖儲(chǔ)備液。

（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取六個(gè)比色管，分別加入0.2、0.4、0.6、0.8、1.00mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用蒸餾水將稀釋到1mL。再加入2mLDNS試劑，100℃水浴反應(yīng)5min。冷卻后，加水至15mL。用紫外分光度計(jì)在波長(zhǎng)540nm處測(cè)吸光度，以水代替木糖作為空白。分別以木糖濃度和吸光度為橫縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到的線性回歸方程為：C=18.86A+25.98，R²=0.999。式中：A為吸光度，C為木糖含量（μg/mL）。

（3）樣品含量測(cè)定

運(yùn)用上述實(shí)驗(yàn)方法，將提取液重復(fù)測(cè)定三次，取三次測(cè)得吸光度的平均值，然后代入線性方程計(jì)算出多糖的含量。

二、結(jié)果與討論

1、超聲微波協(xié)同萃取工藝條件的單因素考察結(jié)果

（1）乙醇含量對(duì)多糖提取率的影響

設(shè)定桃膠中多糖的提取條件為料液比1∶100g/mL、水浴溫度60℃，超聲功率80W、微波功率400W、提取時(shí)間為15min的條件下，采用不同乙醇含量（體積比：0％～90％）提取多糖，結(jié)果如圖1所示。由圖1可知，當(dāng)乙醇含量小于50％時(shí)，隨著乙醇含量的增加，多糖提取率不斷增加，當(dāng)乙醇含量達(dá)到50％時(shí)，多糖提取率也達(dá)到了最高值。當(dāng)乙醇含量高于50％時(shí)，隨著乙醇含量的持續(xù)上升，多糖提取率卻不斷降低。因此，選擇50％乙醇水溶液為后續(xù)試驗(yàn)的提取溶劑。

（2）水浴溫度對(duì)多糖提取率的影響

設(shè)定桃膠中多糖的提取條件為乙醇含量50％，料液比1∶100g/mL、超聲功率80W、微波功率400W、提取時(shí)間為15min的條件下，采用不同水浴溫度（30℃～80℃）提取多糖，結(jié)果如圖2所示。由圖2可知，隨著水浴溫度的升高，多糖提取率逐漸提高，當(dāng)水浴溫度達(dá)到60℃時(shí)，多糖提取率達(dá)到最大值。之后，隨著溫度的持續(xù)升高，多糖提取率呈現(xiàn)下降趨勢(shì)?？赡茉蚴请S著水浴溫度的不斷上升，使提取溶劑的運(yùn)動(dòng)速率及頻率不斷增大，更容易滲透到桃膠組織細(xì)胞中，加速多糖類物質(zhì)的溶出，從而增加多糖提取率。但溫度過高，可能會(huì)導(dǎo)致部分桃膠的結(jié)構(gòu)被破壞，從而使提取率下降。因此，選擇水浴溫度60℃進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

（3）超聲功率對(duì)多糖提取率的影響

為了選擇合適的超聲功率，在乙醇含量50％，水浴溫度60℃，料液比1∶100g/mL、微波功率400W、提取時(shí)間為15min的條件下，分別考查了不同超聲功率（50～100W）對(duì)多糖提取率的影響，結(jié)果如圖3所示。由圖3可知，隨著超聲功率的增加，桃膠中的多糖提取率先增加后減少，在超聲功率80W時(shí)，多糖提取率達(dá)到最大值。原因可能是增大超聲功率有利于液體空穴泡的膨脹和形成，使桃膠組織細(xì)胞破壁能力逐漸增強(qiáng)，多糖的提取率不斷增大。但是，當(dāng)超聲功率大于80W時(shí)，多糖在強(qiáng)剪切作用下發(fā)生斷裂，導(dǎo)致多糖損失，從而使多糖提取率下降。因此，選擇超聲功率為80W。

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