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4、褐變黑枸杞對果蠅急性氧化應激損傷的影響
雙氧水產(chǎn)生的自由基誘導果蠅產(chǎn)生氧化應激損傷。由圖2可知,枸杞能夠有效延長果蠅存活時間,且隨著枸杞濃度的增加,果蠅平均存活時間逐步延長。其中,相比于紅枸杞組,褐變黑枸杞高劑量組果蠅平均存活時間最長。雌、雄性果蠅生長趨勢基本一致,且呈劑量依賴關系。雌性果蠅的平均存活時間高于同劑量組雄性果蠅。
5、褐變黑枸杞對果蠅體內SOD.CAT等抗氧化酶活力及MDA含量的影響
飼喂含枸杞的培養(yǎng)基45d后,收集果蠅測定抗氧化相關酶的活力。由圖3可知,與對照組相比,各劑量組果蠅體內T-SOD和CAT活力均有所提高,脂質過氧化物MDA含量均有一定程度的降低。與紅枸杞低劑量組相比,褐變黑枸杞高劑量組果蠅體內SOD活力顯著提高(P<0.05),其中,雌性果蠅效果更顯著;與對照組相比,紅枸杞組果蠅體內CAT活力無顯著性差異,高劑量的褐變黑枸杞可顯著提高果蠅體內CAT活力(P<0.05),與紅枸杞高劑量組相比,高劑量的褐變黑枸杞可顯著提高雌性果蠅體內CAT活力;與對照組相比,紅枸杞組果蠅體內MDA含量無顯著性差異,高劑量的褐變黑枸杞可顯著提高果蠅體內MDA含量(P<0.05),與紅枸杞高劑量組相比,高劑量的褐變黑枸杞可顯著提高雄性果蠅體內MDA含量(P<0.05)。
6、褐變黑枸杞對果蠅抗氧化相關基因表達水平的影響
由圖4可知,與對照組相比,各劑量組SOD1、SOD2和CATmRNA表達水平有一定程度的提高,其中,紅枸杞組無顯著性差異,褐變黑枸杞組SOD1、SOD2mRNA表達水平顯著升高(P<0.05)。與紅枸杞高劑量組相比,高劑量的褐變黑枸杞顯著提升了雌性果蠅體內SOD2基因mRNA的表達。MTH是感應細胞外信號的偶聯(lián)接受因子,MTH基因的下調可以增強體內抗氧化水平,延緩果蠅衰老。由實驗結果可知,在飲食中添加一定量的枸杞可以在一定程度上下調MTH基因的表達。與對照組相比,紅枸杞組無顯著性差異,褐變黑枸杞可以對果蠅體內MTH基因的下調產(chǎn)生顯著性影響(P<0.05)。同時,與紅枸杞低劑量組相比,高劑量組褐變黑枸杞果蠅體內MTH基因顯著下調(P<0.05)。
三、討論
衰老是個微妙復雜的生命進程,是指生物體各細胞、器官和組織的形態(tài)結構和生理功能隨著年齡的增長而進行的復雜、緩慢、全身性的退化過程。在衰老機制的研究中,自由基學說受到了廣泛關注。該學說認為,清除體內過量自由基是抗衰老、延長壽命的一個有效途徑。SOD、CAT是體內清除02-、H2O2、0H-等自由基的主要抗氧化酶。MDA是自由基作用于脂質發(fā)生過氧化反應的產(chǎn)物,可以引起蛋白質、核酸等生命大分子的交聯(lián)聚合,嚴重損害細胞機能,通常作為機體脂質過氧化程度的主要指標。
果蠅作為典型的抗氧化、抗衰老動物模型。實驗結果顯示,枸杞能夠延長果蠅壽命,褐變黑枸杞延壽效果更顯著,且呈劑量依賴關系。同時,急性損傷實驗中,褐變黑枸杞能夠有效減輕H2O2引起的氧化損傷。酶活力測定結果顯示,與紅枸杞組相比,飼喂褐變黑枸杞組果蠅體內SOD、CAT酶活力顯著升高,MDA含量明顯下降。Realtime-PCR結果顯示,褐變黑枸杞組果蠅體內抗氧化酶SOD1、SOD2和CATmRNA表達水平顯著上調,MTHmRNA表達水平顯著下調。因此,褐變黑枸杞體內抗氧化活性很可能是通過上調內源性抗氧化酶的基因表達實現(xiàn)的。
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