氣相色譜法廣泛應(yīng)用于食品中脂肪酸、農(nóng)藥殘留、毒害物質(zhì)、香精香料、食品添加劑、食品包裝材料中的揮發(fā)物等成分的分析中。

一、食品中脂肪酸含量的測定

(一)分析原理

樣品中脂肪酸一般以甘油三酯形式存在，經(jīng)氫氧化鉀甲醇液甲酯化，生成相應(yīng)的脂肪酸甲酯，經(jīng)氣相色譜分離并定量測定。

(二)儀器與試劑

(1)儀器：Sigma 300氣相色譜儀，LCI-100積分儀，SQF-200B型氫氣發(fā)生器。

(2)試劑：AOCS混合油對照品RM₃SuPelcs 50mg、RM₆SuPelcs 50mg(MATREYA公司提供)；棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸均為氣相色譜標準；乙醚、正己烷、甲醇、氫氧化鉀均為分析純。

(三)測定方法

(1)色譜條件：色譜柱：2.1m×2mm不銹鋼柱，填充15％CP-SIL 84白色高效擔體100-120目。載氣：N₂?？諝猓?0kPa。氫氣：20kPa。檢測器：FID。進樣口溫度：240^°C。檢測器溫度：220^°C。程序升溫：175℃、180^°C、210^°C保持時間分別為7.0min、8.0min、5.0min。升溫速度：30^°C/min。

(2)回歸曲線制作：精密吸取AOCS混合油對照品RM₃ SuPelcs、RM₆ SuPelcs，用乙醚-正己烷(2:1)溶解并稀釋至適當濃度，定體積進樣，制作標準曲線。

(3)樣品制備：取油樣100mg(其他樣品稱樣適當增加)，置10mL容量瓶中，加入乙醚-正己烷(2:1)lmL、甲醇1mL及0.8mol/L氫氧化鉀甲醇溶液1mL，搖勻，靜置5min，加水至刻度，取上層液進樣。

(四)結(jié)果計算

以保留時間定性鑒定各種脂肪酸，以峰面積查標準曲線并計算出各種脂肪酸的含量，以上數(shù)據(jù)由積分儀或計算機處理。

二、食品中有機氯農(nóng)藥殘留量的測定

(一)分析原理

樣品中的有機氯農(nóng)藥經(jīng)提取、凈化與濃縮后，進樣汽化并由氮氣載入色譜柱中進行分離，再進入對電負性強的組分具有較高檢測靈敏度的電子捕獲檢測器中檢出，與標準有機氯農(nóng)藥比較定量。

(二)儀器及試劑

(1)儀器

色譜條件：檢測器為氖源電子捕獲檢測器。色譜柱：玻璃柱，長2m，內(nèi)徑3～4mm，內(nèi)涂以1.5％OV-17和2％QF-1混合固定液的80—100目白色硅藻土擔體(或Chromosorb W)。溫度：進樣器190⁰C，柱溫160℃，檢測器165℃。載氣流速：60mL/min。

(2)試劑

六六六、滴滴涕標準溶液：準確稱取α-666、β-666、γ-666、δ-666、p，p’-DDT；|p，p’-DDD、p，p’-DDE、0，p’-DDT各10.0mg，溶于苯，分別移入100mL容量瓶中，加苯至刻度，混勻，每1mL含農(nóng)藥100.0μg，作為儲備液存于冰箱中。將上述標準儲備液以己烷稀釋至O.01μg／mL作為六六六、滴滴涕標準溶液。

(三)測定方法

1、提取

(1)糧食：稱取20g粉碎并通過20目篩的樣品，置于250mL具塞錐形瓶中，加100mL石油醚，于電動振蕩器上振蕩30min，濾入150mL分液漏斗中，以20—30mL石油醚分數(shù)次洗滌殘渣，洗液并入分液漏斗中，以石油醚稀釋至100mL。

(2)蔬菜、水果：稱取200g樣品置于搗碎機中搗碎1～2min(若樣品含水分少，可加一定量的水)，稱取相當于原樣50g的勻漿，加100mL丙酮，振蕩1min，浸泡lh，過濾。殘渣用丙酮洗滌三次，每次10mL，洗液并入濾液中，置于500mL分液漏斗中，加80mL石油醚，振搖1min，加200mL2％硫酸鈉溶液，振搖1min，靜置分層，棄去下層，將上層石油醚經(jīng)盛有15g無水硫酸鈉的漏斗，濾入另一分液漏斗中，再以石油醚少量數(shù)次洗滌漏斗及其內(nèi)容物，洗液并入濾液中，并以石油醚稀釋至100mL。

(3)乳與乳制品：稱取100g鮮乳(乳制品取樣量按鮮乳折算)，移入500mL分液漏斗中，加100mL乙醇，1g草酸鉀劇烈振搖1min，加100mL乙醚，搖勻，加100mL石油醚，劇烈振搖2min，靜置10min，棄去下層。將有機溶劑層經(jīng)盛有20g無水硫酸鈉的漏斗，小心緩慢地濾入250mL錐形瓶中，再用石油醚少量多次洗滌漏斗及其內(nèi)容物，洗液并入濾液中。以脂肪提取器或K-D濃縮器蒸除有機溶劑，殘渣為黃色透明油狀物。再以石油醚溶解，移入150mL分液漏斗中，以石油醚稀釋至100mL。

(4)各種肉類及其他動物組織：稱取絞碎均勻的20g樣品置于乳缽中，加約80g無水硫酸鈉研磨，無水硫酸鈉用量以樣品研磨后呈干粉狀為度，將研磨后的樣品和硫酸鈉一并移入250mL具塞錐形瓶中，加100mL石油醚，于電動振蕩器上振蕩30min，抽濾，殘渣用約100mL石油醚分數(shù)次洗滌，洗液并入濾液中，將全部濾液用脂肪抽提器或K-D濃縮器蒸除石油醚，殘渣為油狀物。以石油醚溶解殘渣，移入150mL分液漏斗中，加石油醚稀釋至100mL。

2、凈化

(1)于100mL樣品石油醚提取液(富含脂肪的動、植物樣品除外)中加10mL硫酸，振搖數(shù)下后，倒置分液漏斗、打開活塞放氣，然后振搖0.5min，靜置分層，棄去下層溶液，上層溶液由分液漏斗上口倒入另一個250mL分液漏斗中，用少許石油醚洗滌原分液漏斗后，并入250mL分液漏斗中，加100mL2％硫酸鈉溶液，振搖后靜置分層，棄去下層水溶液，用濾紙吸除分液漏斗頸內(nèi)外的水，然后將石油醚經(jīng)盛有約15g無水硫酸鈉的漏斗過濾，并以石油醚洗滌盛有無水硫酸鈉的漏斗數(shù)次，洗液并入濾液中，并以石油醚稀釋至100mL。

(2)于25mL富含脂肪的動、植物油樣品的石油醚提取液中加25mL硫酸，振搖數(shù)下后，倒置分液漏斗，打開活塞放氣，再振搖0.5min，靜置分層，棄去下層溶液，上層溶液由分液漏斗上口倒于另一500mL分液漏斗中，用少許石油醚洗滌原分液漏斗，洗液并入分液漏斗中，加250m12％硫酸鈉溶液，搖勻，靜置分層，以下按(1)自“棄去下層水溶液”起依法操作。

3、濃縮

將分液漏斗中已凈化的石油醚溶液經(jīng)過盛有15g無水Na₂SO₄的小漏斗，緩慢濾入K-D濃縮器中，并以少量石油醚洗盛有無水Na₂S0₄的漏斗3～5次，合并洗液與濾液，然后于水浴上將濾液用K-D濃縮器濃縮至約O.3mL(不要蒸干，否則結(jié)果偏低)，停止蒸餾濃縮，用少許石油醚淋洗導管尖端，最后定容至0.5～1.0mL，搖勻，塞緊，供測定用。

4、測定

(1)標準晦線的繪制：吸取BHC與DDT標準混合溶液l，2，3，4，5μL分別進樣，根據(jù)各農(nóng)藥組分含量(ng)與其相對應(yīng)的峰面積(或峰高)，繪制各農(nóng)藥組分的標準曲線。

(2)樣品測定吸取樣品處理液1.0～5.0μL進樣，記錄色譜峰，據(jù)其峰面積(或峰高)于六六六與滴滴涕各異構(gòu)體的標準曲線上查出相應(yīng)的組分含量(ng)。

(四)定性定量分析

根據(jù)標準六六六與滴滴涕的各個異構(gòu)體的保留時問進行定性。六六六與滴滴涕的各個異構(gòu)體出峰順序為：α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-六六六，p，p’一DDE，o，p’-DDT，p，p’-DDD，p，p’-DDT。

從標準曲線上查出相應(yīng)含量；計算樣品中BHT、DDT的不同異構(gòu)體或衍生物的單一含量，最后，將六六六、滴滴涕的不同異構(gòu)體或衍生物單一含量相加，即得出樣品有機氯農(nóng)藥六六六、滴滴涕的總量。

參考資料：現(xiàn)代食品檢測技術(shù)

相關(guān)鏈接：氣相色譜儀，六六六，滴滴涕