1實(shí)驗(yàn) 

1.1材料試劑 

甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液ρ=10mg/mL，(壇墨質(zhì)檢，GBW(E)082260b)。正庚烷，國(guó)產(chǎn)色譜純；亞硝酸鈉、硫酸、氯化鈉，國(guó)產(chǎn)分析純。 

1.2儀器設(shè)備 

7890A安捷倫氣相色譜儀(附氫離子火焰檢測(cè)器，HP－5毛細(xì)色譜柱)。醫(yī)用離心機(jī)(最高轉(zhuǎn)速4000r/min)；回旋振蕩器(振蕩頻率40～1000rpm)；移液器(量程10～100μL，100～1000μL)；電子天平(最大量程1000g，最小分度值1mg)；15mL有刻度帶蓋螺口PP離心管。 

1.3樣品處理 

稱取4.00g試樣于15mL離心管中。

1.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

直接用移液器分別吸取甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液ρ=10mg/mL：0、0.010、0.025、0.050、0.10、0.25、0.50mL于15mL離心管中，得標(biāo)準(zhǔn)系列：0、0.10、0.25、0.50、1.0、2.5、5.0mg。各加水至4mL。 

1.5測(cè)定方法

將準(zhǔn)備好的標(biāo)準(zhǔn)系列管和樣品管一同放入冰箱冷凍層中冷凍5min后取出。向各管準(zhǔn)確加入正庚烷2.00mL，加入亞硝酸鈉(50g/L)和硫酸溶液(100g/L)各1.00mL，蓋緊離心管蓋混勻后再放入冰箱冷凍30min。取出后，加入1g氯化鈉，旋緊離心管蓋子后橫向固定于回旋震蕩器上，以290r/min震蕩3min后取下，3000r/min離心，取正庚烷層，進(jìn)樣1μL供氣相色譜分析。 

1.6儀器條件

色譜柱：HP－5毛細(xì)管色譜柱(30m×0.32mm×0.25μm)；程序升溫：柱溫70℃保持3.5min；進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比5∶1；柱流速：2.4mL/min；檢測(cè)器溫度：250℃，氫氣：30mL/min；空氣：300mL/min。 

2結(jié)果與討論 

2.1線性范圍和檢出限

用改進(jìn)法處理樣品后，以0.1～5.0mg含量標(biāo)準(zhǔn)液的峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，相關(guān)系數(shù)r=0.9999，表明呈線性關(guān)系。用三倍信噪比計(jì)算儀器檢出限為0.0159mg。取液體樣4g為例，得方法檢出限為0.0040g/kg。而用GB/T5009.97－2016國(guó)標(biāo)法處理樣品后檢測(cè)，相關(guān)系數(shù)r=0.9995，儀器檢出限為0.0292mg。取樣4g得方法檢出限為0.0073g/kg。色譜圖和校正曲線對(duì)比見(jiàn)圖1與圖2。

2.2精密度和回收率 

(1)使用改進(jìn)法與國(guó)標(biāo)法分別重復(fù)處理同一樣品測(cè)定，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。使用Excel表格進(jìn)行t檢驗(yàn)，得p=0.093，P＞0.05表明兩組數(shù)據(jù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，改進(jìn)法和國(guó)標(biāo)法的測(cè)定結(jié)果相同。

(2)對(duì)飲料樣品的回收率見(jiàn)表2。

用改進(jìn)法分別對(duì)各種飲料類樣品進(jìn)行加標(biāo)測(cè)定，回收率在92%～105%之間，符合檢測(cè)要求。

3結(jié)論

采用減少處理用樣品量的改進(jìn)法測(cè)定樣品，與原GB/T5009.97－2016國(guó)標(biāo)法相比，檢出限、重復(fù)性都得到改善。不但可以減少試劑的使用，降低成本，而且在正庚烷提取的過(guò)程中可以同時(shí)把30份以上的樣品放置于回旋震蕩器上震蕩提取，大大減少了逐個(gè)振搖所需的時(shí)間，提高工作效率。同時(shí)振搖可以統(tǒng)一樣品提取的條件，降低人工操作的誤差，從而改善標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性，提高樣品測(cè)定的重復(fù)性。降低取樣量及試劑量，以小體積振搖，在振搖力度相同的情況下，能使溶液間得到更充分的接觸，提高了有機(jī)溶劑的提取效率，同樣濃度的含量可以得到更大的峰面積，降低檢出限，即使取樣量減少也能滿足檢測(cè)要求。綜上，本改進(jìn)法既節(jié)省試劑耗材，又節(jié)省人工時(shí)間，同時(shí)改善樣品測(cè)定的重復(fù)性、降低檢出限，又不需要另外購(gòu)買(mǎi)昂貴儀器，經(jīng)濟(jì)實(shí)用，適合基層實(shí)驗(yàn)室工作改進(jìn)。

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