2.2.1食品添加劑檢測

5-單磷酸鳥苷(GMP)作為調(diào)味劑，廣泛應(yīng)用于各類食品。過量攝入GMP會對人體造成危害。因此，Liu等通過檸檬酸鹽(Cit)和稀土離子的自組裝，成功制備了一種新型的稀土配位聚合物納米材料Cit/Tb,用于嬰幼兒配方食品和火腿樣品中GMP的定量檢測，對GMP具有良好的選擇性和靈敏度。

2.2.2藥物殘留檢測

藥物殘留是動物源食品檢測中的一項重要指標(biāo),TRFIA不僅可用于奶制品中萬古霉素、利福昔明、呋喃它酮等抗生素，類藥物的檢測，還可以檢測肉制品中瘦肉精類藥物,與其它傳統(tǒng)方法相比，該方法檢測靈敏度高、特異性強、與類似藥物的交叉反應(yīng)性均<1%。

2.2.3其它物質(zhì)檢測

真菌毒素是由于真菌在食品或者飼料里生長所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，主要包括黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、T-2毒素等，近幾年對其在食品檢測方面的研究越來越受到關(guān)注。最近，Yang等建立了一種新的免疫分析方法，以Eu3+-DTTA作為第一探針，辣根過氧化物酶(HRP)作為第二探針，通過TRFIA、化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫吸附分析(CL-ELISA)兩種技術(shù)結(jié)合并行輸入輸出操作(PI-PO),實現(xiàn)對谷物中伏馬菌素B1(FB1)、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON)及去環(huán)氧脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DOM-1)三種真菌毒素的同時檢測，靈敏度分別為0.088ng/mL、4.74ng/mL和4.56ng/mL。

食源性致病菌作為引發(fā)食源性疾病的重要因素，已經(jīng)引起社會各界的廣泛重視。Wang等以大腸桿菌O157∶H7的O-特異鏈多糖組分單克隆抗體與Eu-螯合物結(jié)合，作為熒光標(biāo)記物，通過TRFIA法快速、定量檢測食品中大腸桿菌O157∶H7,最低檢測限5×102CFU/mL。

2.3TRFIA在環(huán)境監(jiān)測中的應(yīng)用

TRFIA自開創(chuàng)以來，憑借其靈敏度高的優(yōu)勢(表3),在環(huán)境痕量檢測領(lǐng)域發(fā)展迅速，主要應(yīng)用包括藥物殘留、化工試劑及一些生物毒素的檢測。

2.3.1藥物殘留檢測

開展全面、系統(tǒng)的農(nóng)藥殘留監(jiān)測工作在一定程度上能夠?qū)ν寥篮退w環(huán)境風(fēng)險進行評估。Shi等以Eu3+-DTTA和Sm3+-DTTA分別與兩種單克隆抗體L1-Ab、A1P1-Ab偶聯(lián)作為熒光標(biāo)記物，建立了一種靈敏的雙標(biāo)記TRFIA法同時檢測環(huán)境中吡蟲啉和對硫磷，檢測限分別為0.028μg/L和0.025μg/L,與氣相色譜法相比，該方法能顯著縮短樣品前處理的時間消耗，并且實驗結(jié)果可靠。

此外，近年來獸藥殘留逐漸成為主要環(huán)境污染物之一，國內(nèi)外對其檢測標(biāo)準(zhǔn)越來越高。最近，Zhang等利用牛血清白蛋白(BSA)與環(huán)丙沙星(CIP)偶聯(lián)制備的免疫抗原，設(shè)計了一種對氟喹諾酮類藥物(FQs)具有高特異性的單克隆抗體，在此基礎(chǔ)上，建立了一種TRFIA法，用于高通量分析環(huán)境水體中12種FQs的總濃度，從而對鎮(zhèn)江市內(nèi)江地區(qū)的環(huán)境風(fēng)險進行評估。

2.3.2化工試劑檢測

鄰苯二甲酸酯(PAEs)是目前應(yīng)用最為廣泛的一類化工試劑，我國許多地區(qū)的水環(huán)境均受到不同程度PAEs污染。Zhu等為監(jiān)測鎮(zhèn)江市河流中的痕量鄰苯二甲酸二乙酯(DEP),建立了一種以磁性微粒(MPs)為固體載體的直接競爭TRFIA法。在檢測系統(tǒng)中，以羊抗兔抗體為連接物，將抗DEP抗體固定在MPs表面，用Eu3+-螯合物標(biāo)記DEP-OVA,通過TRFIA在環(huán)境水樣品中檢測到的DEP濃度為2.98～65.18ng/mL。

2.3.3生物毒素檢測

除上述人工合成的環(huán)境污染物外，TRFIA還可以用于檢測環(huán)境中的生物毒素。Niu等建立了間接競爭TRFIA法測定太湖源水中的微囊藻毒素-LR(MC-LR),檢測限為0.01μg/L,動態(tài)測量范圍為0.05～2μg/L,該方法憑借其高靈敏度和簡便、快速的優(yōu)點，取代了常規(guī)的色譜法和ELISA法，成為定量檢測水樣中MC-LR的新方法。

3總結(jié)與展望

時間分辨熒光免疫分析技術(shù)自從20世紀(jì)70年代末提出以來，其檢測系統(tǒng)逐漸發(fā)展成熟，檢測靈敏度不斷提高，在痕量檢測領(lǐng)域的應(yīng)用越來越廣泛。

然而，目前時間分辨熒光免疫技術(shù)還有很大的發(fā)展空間。在螯合劑設(shè)計方面，可以直接合成更多有效的親水性有機配體，用于螯合稀土離子，制備熒光性能強、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、具有良好生物相容性的標(biāo)記物，進一步擴大其應(yīng)用范圍；在稀土摻雜納米材料制備方面，對已有的方法進行適當(dāng)改進，或是提出新的、可行的制備方法，以獲得高質(zhì)量產(chǎn)物；在實際應(yīng)用方面，在解離-增強鑭系元素?zé)晒夥治鱿到y(tǒng)、固相熒光(FIAgen)分析系統(tǒng)、酶放大分析系統(tǒng)和均相TRFIA分析系統(tǒng)的基礎(chǔ)上逐步完善檢測技術(shù)體系，拓寬TRFIA的應(yīng)用領(lǐng)域，提高其檢測靈敏度。此外，還可以將TRFIA技術(shù)與PCR、激光等技術(shù)聯(lián)用，促進免疫分析技術(shù)的發(fā)展。隨著國內(nèi)外的深入研究，TRFIA技術(shù)將不斷創(chuàng)新，其檢測特異性、靈敏度進一步提高，在疾病診斷、食品安全和環(huán)境健康領(lǐng)域具有更廣闊的應(yīng)用前景。

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