3、活性炭柱

活性炭是一種非極性吸附劑，用于脫色具有極好的效果，通常在含色素較多的有機磷農(nóng)藥殘留分析中可用此法凈化。進口活性炭品種有:Norit,Sgextra,Nuchar C190N,Dar CO G60等，國產(chǎn)有化學(xué)純活性炭、層析用活性炭,767型活性炭等。

市售活性炭均需進行活化處理:取一定量活性炭在600 ^oC加蓋灼燒2 h，冷至常溫后，加濃鹽酸煮沸30min,用蒸餾水反復(fù)洗至中性在130^oC烘干，貯存于全玻璃密封容器中備用。

雖然活性炭對色素吸附能力很強，但對脂肪、蠟質(zhì)的吸附卻很弱，因此最好能與其它吸附劑混用。

4、硅膠柱

在硅酸鈉的水溶液中，加入鹽酸或硫酸可獲得一種多聚硅酸凝聚成的溶膠沉淀，這種沉淀經(jīng)部分脫水，便形成無定形多孔的硅膠。硅膠骨架表面含有能水解的硅醇基Si-OH，可與極性化和物或不飽合化合物形成里鍵，使硅膠具有吸附性。硅膠骨架中含有硅氧橋Si-O-Si，尤其是pH9以上介質(zhì)中水解明顯增加，這將破壞硅膠結(jié)構(gòu)，所以硅膠層析凈化時不能在強堿性介質(zhì)中進行。另外，硅膠的層析性與無定形多孔物質(zhì)的固體骨架和坑穴系統(tǒng)密切相關(guān)，硅膠受熱時坑穴系統(tǒng)會發(fā)生變化。因此，硅膠活化時溫度不得超過200℃，通常130^oC烘制2h后，備用。鑒于甲醇、乙醇類溶劑會顯著降低吸附劑的活性，所以避免使用。

5、混合柱

將具有不同吸附性能的吸附劑按不同比例混合裝柱，讓各自吸附能力優(yōu)勢互補，這對于凈化較為復(fù)雜的試樣能獲得更好的凈化效果。例如，將活性炭、氧化鎂、氧化鋁和弗羅里硅土混合裝柱，可使色索、脂肪、蠟質(zhì)都得到吸附。在混合柱中有時量加入一定比例的硅藻土或助濾劑，有調(diào)節(jié)淋洗速度的作用。

在上述柱層析法中，形響柱效的因素之一就是裝柱。裝柱有干法和濕法兩種方式。干法系在底部有活塞的玻璃柱(內(nèi)徑1.5cm左右，長30cm左右)中塞少許凈化過的玻璃棉以支排吸附劑，依次加入1cm～2cm高的無水Na₂SO₄；適量吸附劑。和1 cm～2 cm厚的無水Na₂SO₄，敲實后即可。濕法裝柱是將吸附劑與淋洗劑混勻后一起倒入層析柱中，要求吸附劑中無氣泡、

裂柱，吸附劑要分布勻?qū)崳絼┎坏帽┞队诳諝庵?，頂部再放?cm ～2 cm厚的無水Na₂SO₄。

淋洗操作的要求是:淋洗液應(yīng)沿柱壁緩慢倒入，不得損壞柱內(nèi)吸附劑表層的平整性。同時不能讓淋洗劑液面降至吸附劑表層之下，否則失去淋洗劑的浸潤后，吸附劑發(fā)生開裂，使住體出現(xiàn)氣泡或溝流從而影響分離效果。此外淋洗劑流出速度不要太快，以免柱中交換來不及達(dá)到平衡，也不可太慢，否則操作時間過長。通常講洗速度為5 mL/min左右。淋洗劑用量與其極性、待測物極性及吸附劑活性有關(guān)，確定一個方法需收集哪一段淋出液，收集多少量，應(yīng)通過測定淋洗曲線來判斷。

6、微柱法

70年代末期，微型柱應(yīng)用于農(nóng)藥殘留檢測后，大大提高了凈化效率，因而使用范圍愈來愈廣。微型柱系用聚四氟乙烯制成的柱(容積為1.0 mL至60 mL)內(nèi)含0.1g至10g吸附劑〔40μm)。微柱具有以下特點:①速度快，一般流速達(dá)5 mL/min～10 mL/min，大部樣品的凈化只需2 min便可完成，為常規(guī)方法的1/6；②準(zhǔn)確性、重復(fù)性好，又可進免交叉污染；③回收率高，避免樣品損失，且無乳化現(xiàn)象;④節(jié)約費用，無需太多的器皿和設(shè)備，溶劑消耗少:⑤活化簡捷等。

4、其他凈化法

吹掃蒸餾法、薄層層析法，凝膠滲透層析法、色譜往前里柱等凈化法也常用于土壤中有機污染物測定的前處理過程中。

五、濃縮

使大體積溶液中溶劑減少、待測組份濃度增高的操作步驟為濃縮，濃縮是環(huán)境樣品中有機污染分析測定技術(shù)中必不可少的一個環(huán)節(jié)，有時在一種檢測方法中要多次用到濃縮，以便使溶液體積達(dá)到所需要求。濃縮過程中很容易造成待測物的很失，尤其是揮發(fā)性有機物，因此要特別注意。當(dāng)濃縮至體積很小時，要控制速度不能太快，否則將使回收率降低。一般要求濃縮回收率〕90%。常用的濃縮方法有下列幾種:

1、自然揮發(fā)法

將需濃縮的溶液里于室溫下，任其溶劑自然蒸發(fā)，以達(dá)到濃縮的目的。此法簡便但需時間長。

2、吹氣法

向待濃縮的溶液表面吹惰性氣體或干操空氣，使溶劑加速揮發(fā)。

3、K-D濃縮儀濃縮法

K-D濃縮儀系由K-D瓶、施耐德管和冷凝器及接收瓶組成，在減壓的條件下進行蒸餾，使溶劑從溶液中蒸出，溶液中待測物濃度增加。此方法簡便，待測物不易損失，是普遍使用的一種濃縮方法。

4、真空旋轉(zhuǎn)濃縮法

本法需用旋轉(zhuǎn)濃縮蒸發(fā)儀在減壓、加溫、旋轉(zhuǎn)條件下進行濃縮，其濃縮速度快、待測物不易損失，是最常用的較為理想的一種方法。

六、衍生化

有些有機物在所選定的檢測方法中不能被很好地測定，通過衍生化可使其測定性能得到改善。例如，除草劑三氯乙酸在配有電子捕獲檢定器的氣相色譜儀(GC-ECD)中分離和位定效果都不佳，經(jīng)酯化衍生成三氯乙酸甲酯后。不僅分離效果改善了，而且檢測靈敏度也提高了兩個數(shù)量級。因而，衍生化是有機污染物測試中經(jīng)常使用的方法。

下面簡單介紹一些常用的衍生法。

1、烷基化(Alkylation)

烷基化常用于制備多種有機物如:羧酸、脂質(zhì)化合物、甘油酯、多元酚類的衍生物。最常用的烷基試劑有甲醇、甲醇/硫酸、甲醇/鹽酸、硫酸二甲酯、重氮甲烷等。

2、硅烷基化(Silylation)

硅烷基化系用三甲墓甲硅烷基(CH³)₃Si-(TMS)取代HO、HS及HN基中的活潑氫而制成衍生物。TMS衍生物的制備相當(dāng)容易且反應(yīng)快，所得衍生物也比其它衍生物揮發(fā)性大、極性小、熱穩(wěn)定性好。此衍生法要求在非水介質(zhì)中進行。

可用硅烷基化制備衍生物的有:醇、胺、酚、糖、氨基酸、維生素、多元醇等。常用的衍生劑有六甲基二硅氨烷(HMDS)、三甲基氯硅烷(TMCS)及雙-三甲基甲硅烷基乙酸胺(BSA)。衍生化的方法是:將樣品用HMDS:TMCS(3:1)在吡啶中進行反應(yīng)，反應(yīng)溫度60^oC ～80℃，加熱回流數(shù)小時直到反應(yīng)完成，副產(chǎn)物為氯化銨沉淀，對測定無干擾。吡啶也可用與試劑不起反應(yīng)的其它溶劑如二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亞砜(DMSO)、乙腈、二氧六環(huán)、四氫呋喃等代替。

3、三氟乙?；?/p>

許多有機物的三氟乙酰化的衍生物因其揮發(fā)性大，制備簡單，常用于氣相色譜分析。由于氟原子具有很大的電子親合力，使電子捕獲檢測器得到很好的靈敏度，尤其是在分析含一NH₂官能團的化合物如游離胺或氮基酸時，三氟乙?；鞘钟杏玫摹?/p>

4、鹵代酯化

含一NH₂、一OH,-SH的化合物可用鹵代酸酯或酸酐進行反應(yīng)，生成鹵代酯化衍生物，后者可用GC-ECD(配電子捕獲檢測器的氣相色譜儀)分離鑒定。常用的鹵代酯化劑有:五氟芐基酯、五氟丙酰醋、七氟丁酰酯(或七氟丁酸酐)。

5、二峭基苯基化

胺和酚的2.4-二硝基苯衍生物具有強烈的俘捕電子的特性，GC-ECD對其檢測極限常低于納克((ng)級。此方法也可用于氨基甲酸酯類農(nóng)藥及其含酚代謝物的測定。

6、氧化法

亞硝胺通過氧化可轉(zhuǎn)化為硝基胺，后者用GC-ECD測定時，比前者用火焰離子化檢測器(FID)測定的響應(yīng)值大200倍。操作過程為:將1mL亞硝胺的二氯甲烷溶液里于具塞試管中，加入1mL過氧三氟乙酸(PTFA )，混合，放置3.5 h。再滴入1滴～2滴水，加碳酸鈣以分解過量的PTFA。經(jīng)無水Na₂SO₄脫水干操后，吸取清液進樣，用GC-ECD檢測(色譜柱為Carbowax 20M柱,Tc140^oC)。

參考資料：土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)分析方法