3 NMR在藥用輔料質(zhì)量控制中的應(yīng)用

藥用輔料是藥品重要的組成部分，藥品中大部分成分是藥用輔料，其質(zhì)量關(guān)系到所有藥品的安全性，藥用輔料質(zhì)量問題會涉及到使用該輔料的所有制劑，往往會引起整個藥品行業(yè)的系統(tǒng)性風險。同時，藥用輔料是影響仿制藥一致性評價的重要因素。隨著對藥用輔料質(zhì)量的關(guān)注，越來越多的技術(shù)應(yīng)用于藥用輔料的質(zhì)量控制中，NMR也不例外。例如，聚山梨酯80，又稱吐溫80，常用作助溶劑、乳化劑和穩(wěn)定劑，為藥物制劑中常見的輔料之一。由于聚山梨酯80是多種組分的混合物，且各組分之間理化性質(zhì)相差不大，利用常規(guī)液相色譜法、紫外分光光度法、理化方法不能有效分離其中各組分，也就不能有效鑒別聚山梨酯80。張琪等利用1H、13C NMR、HSQC、HMBC以及同核位移相關(guān)譜（1H-1H COSY）等，對聚山梨酯80的結(jié)構(gòu)式進行解析，并將其NMR信號進行了歸屬，為進一步研究聚山梨酯80奠定了很好的基礎(chǔ)。脂肪油是一類重要的藥用輔料，廣泛用于軟膏、乳劑、搽劑、栓劑等藥物劑型。酸值是控制脂肪油類輔料質(zhì)量控制的重要參數(shù)。Skiera等利用q HNMR測定了305種脂肪油類樣品，并將測定結(jié)果與傳統(tǒng)的酸值測定結(jié)果比較，兩者測定結(jié)果一致。該研究結(jié)果表明對于這些成分的質(zhì)量控制q NMR可以取代傳統(tǒng)的酸值測定。

4 NMR在化學(xué)藥品標準物質(zhì)研制中的應(yīng)用

藥品標準物質(zhì)是藥品檢驗的物質(zhì)基礎(chǔ)，是藥品成分測量的基準，是確定藥品真?zhèn)蝺?yōu)劣的對照，也是控制藥品質(zhì)量必不可少的工具?；瘜W(xué)藥品標準物質(zhì)是藥品標準物質(zhì)中占比最大的一類，其定值通常采用質(zhì)量平衡法，分別測定主成分中有機雜質(zhì)、水分、殘留溶劑、無機雜質(zhì)（灰分）等的含量，加上主成分的含量應(yīng)為100%。但是質(zhì)量平衡法易受多種因素的影響，例如，色譜法測定純度時，不同雜質(zhì)由于結(jié)構(gòu)不同會產(chǎn)生不同響應(yīng)值，或者在選定的色譜條件下某些雜質(zhì)檢測不到，這樣就會造成色譜法測定有機雜質(zhì)的結(jié)果不準確。為了防止質(zhì)量平衡法對藥品標準物質(zhì)定值時出現(xiàn)較大誤差，通常采用多種不同原理的其他定值方法對其進行驗證。這些定值方法中，q NMR是目前應(yīng)用較多的方法。Shen等利用q HNMR對硫酸阿托品的含量進行了測定，其結(jié)果與質(zhì)量平衡法的結(jié)果一致。同時，通過1H NMR發(fā)現(xiàn)硫酸阿托品構(gòu)型異構(gòu)體的存在，并利用NMR變溫實驗進一步確認該現(xiàn)象，從而糾正文獻報道的利用q HNMR測定硫酸阿托品含量的錯誤。Wu等以有證標準物質(zhì)鄰苯二甲酸氫鉀作為核磁共振（NMR）定量內(nèi)標物，利用q HNMR對鹽酸小檗堿、鹽酸巴馬汀、延胡索乙素和鹽酸黃柏堿4個原小檗堿類化學(xué)對照品進行含量測定，其結(jié)果與質(zhì)量平衡法定值結(jié)果一致，并通過方法學(xué)驗證表明建立的q HNMR滿足定量的要求，可作為質(zhì)量平衡法定值的一種有效和可靠的補充方法，而且將上述4個化學(xué)對照品的量值溯源到有證標準物質(zhì)。筆者在標準物質(zhì)研制過程中，采用q HNMR對去水衛(wèi)矛醇、鹽酸曲唑酮和磷酸二酯酶-5抑制劑等化學(xué)藥品標準物質(zhì)進行含量測定研究，結(jié)果表明q HNMR非常適合于這些標準物質(zhì)的含量測定，為其定值提供了新的測定方法。

5 NMR在藥物代謝研究中的應(yīng)用

藥物代謝分析可以為新藥研究、臨床藥物監(jiān)測和用藥安全提供重要依據(jù)，在新藥研發(fā)和藥物質(zhì)量控制方面起著極為重要的作用。目前藥物代謝分析主要使用色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS或LC-MS）和NMR技術(shù)。由于NMR在代謝分析中具有以下優(yōu)點:1）樣品只需要簡單的預(yù)處理；2）屬無損檢測，不會破壞樣品；3）可在接近生理條件下進行實驗，可在一定溫度和緩沖液范圍內(nèi)選擇實驗條件；4）可進行實時和動態(tài)的檢測，豐富的譜編輯技術(shù)可以在不分離樣品的情況下，部分分離和歸屬復(fù)雜樣品中的代謝物的信號；5）混合物中不同代謝物響應(yīng)系數(shù)一致，屬于無偏向檢測技術(shù)；6）譜信號強度與樣品濃度成正比，可對代謝物進行定量分析?；谝陨蟽?yōu)點，NMR技術(shù)在藥物代謝分析中發(fā)揮了非常重要的作用。藥物代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定是藥物代謝分析的重要內(nèi)容之一。Duan等對昂丹司瓊的代謝產(chǎn)物進行研究，從大鼠的糞便和膽汁中共分離得到5個代謝產(chǎn)物，其結(jié)構(gòu)主要通過1H NMR、13C NMR、HMBC以及二維NOE譜（NOESY）得以最終的確定：4個為昂丹司瓊Ⅰ相代謝產(chǎn)物（7-羥基昂丹司瓊，8-羥基昂丹司瓊，7-羥基-N-去甲基昂丹司瓊，8-羥基-N-去甲基昂丹司瓊）和1個Ⅱ相代謝產(chǎn)物（N-去甲基昂丹司瓊-7-O-β-D-葡萄苷酸），其中3個為首次報道的代謝產(chǎn)物。Sharma等對氟班色林的大鼠尿液和糞便的代謝產(chǎn)物進行研究，利用UHPLC-Q-TOF-MS/MS不能最終確定其氮氧化代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)，作者采用1H NMR和1H-1H COSY譜對其確認，屬于首次報道氟班色林生物基質(zhì)中的氮氧化代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)。液相色譜-核磁共振聯(lián)用（LC-NMR）是利用液相色譜對復(fù)雜成分的樣品進行分離，利用NMR提供化合物豐富的結(jié)構(gòu)信息，因此，LC-NMR為藥物代謝物研究提供了一種強有力的新方法。例如Gschwind等研究8-(N-2-羥基-5-氯苯甲?；?氨基羊脂酸（5-CNAC）人體內(nèi)的代謝和分布，利用LC-NMR和LC-MS/MS對人的血、尿和糞便中的代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)進行了鑒定，并闡明了該藥物在人體內(nèi)的代謝途徑。

6小結(jié)

綜上所述，NMR在藥物發(fā)現(xiàn)、藥物和藥用輔料質(zhì)量控制、化學(xué)藥品標準物質(zhì)研制和藥物代謝研究等方面有著廣泛的應(yīng)用。NMR的優(yōu)勢明顯，其唯一不足是靈敏度不及質(zhì)譜等高靈敏度分析技術(shù)。但是，隨著譜儀場強的不斷升高，超低溫探頭的應(yīng)用等，NMR的靈敏度將會得到不斷的提升。近年來，隨著NMR硬件的不斷改進，新的脈沖方法不斷出現(xiàn)，LC-NMR和LC-NMR-MS等聯(lián)用技術(shù)的開發(fā)，固體NMR(ssNMR）的應(yīng)用，二維核磁定量技術(shù)以及與化學(xué)計量學(xué)的結(jié)合應(yīng)用等，NMR在藥學(xué)領(lǐng)域?qū)玫皆絹碓綇V泛的應(yīng)用。

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