北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
培養(yǎng)基 | 酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,瓊脂:15.0,pH:7.0±0.1(25℃) |
傳代方法 | 1.Stbl3感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅速插入冰中),加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。 2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。 3.向離心管中加入0.9 mL 室溫S.O.C. 培養(yǎng)基或LB培養(yǎng)基(推薦使用SOC培養(yǎng)基,可提高轉(zhuǎn)化效率)。 4.30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí), 30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化controlPUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘。) 5.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 培養(yǎng)基上。 6.將平板倒置放于30℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。(若轉(zhuǎn)化controlPUC19 計(jì)算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃培養(yǎng)過(guò)夜) |
生長(zhǎng)條件 | 37℃;18-24h;好氧 |
存儲(chǔ)條件 | -80℃ |
安全等級(jí) | 1 |
共享方式 | 公益性共享 |
證書下載 | 說(shuō)明書文件 |
通話對(duì)您免費(fèi),請(qǐng)放心接聽
溫馨提示:
1.手機(jī)直接輸入,座機(jī)前請(qǐng)加區(qū)號(hào) 如13803766220,010-58103678
2.我們將根據(jù)您提供的電話號(hào)碼,立即回電,請(qǐng)注意接聽
3.因?yàn)槟潜唤蟹剑ㄔ拰?duì)您免費(fèi),請(qǐng)放心接聽