北方偉業(yè)計(jì)量集團(tuán)有限公司
培養(yǎng)基 | RPMI-1640完全培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS |
傳代方法 | 復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中,迅速?zèng)]入 37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以 1 分鐘內(nèi)全部 溶解為宜;②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有 9ml 完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm/min 離心 5 分鐘,棄去 上清液,用 1-2mL 完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③然后將細(xì)胞懸液加入到含有 5-6mL 完全培養(yǎng)基的 T25 瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS 清洗兩遍后,加入 1-2mL 胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況, 在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,肉眼可見細(xì)胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù) 消化),直接吸掉胰酶,加入 5-6 毫升完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。③將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到 新的 T25 瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基 pH 值變化和細(xì)胞密度,定期換 液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%-90%時(shí),重復(fù)傳代操作或者凍存。 |
生長條件 | 培養(yǎng)溫度37℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣; |
生長特性 | 貼壁生長 |
存儲(chǔ)條件 | 液氮 |
安全等級(jí) | 1 |
形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣,多角形,不規(guī)則形,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長 |
分離基物 | NCI-H292細(xì)胞源自肺支氣管黏液上皮樣癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶;先用成份限定的培養(yǎng)基分離得到,然后換成含血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)。 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 培養(yǎng)條件下,NCI-H292細(xì)胞保留了黏液上皮的特性,可從其超微結(jié)構(gòu)的表現(xiàn)和多種鱗狀上皮分化標(biāo)記的表達(dá)而判斷。NCI-H292細(xì)胞支持HBV的生長,左旋多巴脫羧酶陰性。NCI-H292細(xì)胞可以作為篩選模型,將人類亞基因組片段轉(zhuǎn)染入細(xì)胞來研究HBV及其自身基因在病毒性肝炎和肝癌發(fā)生中的作用。NCI-H292細(xì)胞角蛋白、波形蛋白、黏液洋紅染色陽線,但神經(jīng)絲三聯(lián)蛋白陰性。 |
共享方式 | 公益性共享 |
證書下載 | 說明書文件 支原體檢測報(bào)告 |
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