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建立滿山紅葉HPLC指紋圖譜并測定杜鵑素含量(二)

發(fā)布時(shí)間:2021-04-15 22:45 編輯者:夏德婷

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 線性關(guān)系考察

取“2.1”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液,加適量甲醇制成每1 mL含100、50、25、12.5、6.25、3.125 μg的對(duì)照品溶液,照“2.3.1”項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)條件,用高效液相色譜儀檢測,峰面積為X軸,以含量為Y軸,得到杜鵑素的回歸方程為Y=2E+0.9X-492 161,r=0.999 5,線性范圍3.125~100 μg,表明線性良好。

2.4.2 精密度試驗(yàn)

選用適量的“2.2”項(xiàng)供試品溶液,根據(jù)“2.3.1”項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)條件,連續(xù)進(jìn)樣6次,10個(gè)共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD<1%,相對(duì)峰面積的RSD<3%,供實(shí)驗(yàn)用儀器具有良好的精密度,結(jié)果見表2,表3。

2.4.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)

選用適量的“2.2”項(xiàng)供試品溶液,根據(jù)“2.3.1”項(xiàng)確定的色譜條件,在0、2、5、8、14、18、24 h依次測定,10個(gè)共有峰的相對(duì)保留時(shí)間RSD<2%,相對(duì)峰面積RSD<3%,證明該溶液24 h內(nèi)化學(xué)成分穩(wěn)定,結(jié)果見表4,表5。

2.4.4 重復(fù)性試驗(yàn)

根據(jù)“2.2”項(xiàng)確定的供試品制作方式制作6份,分別根據(jù)“2.3.1”項(xiàng)確定的色譜條件檢測,分析說明10個(gè)共有峰的相對(duì)保留時(shí)間RSD<1%,相對(duì)峰面積的RSD<3%,具備良好的重復(fù)性,結(jié)果見表6,表7。

2.5 滿山紅葉中杜鵑素含量測定

用“2.2”下方法,制備15批滿山紅葉的供試品溶液;取“2.1”下對(duì)照品適量,用適量甲醇稀釋成每1 mL含0.05 mg的對(duì)照品溶液,按照“2.3.1”項(xiàng)的色譜條件,分別用高效液相色譜儀檢測,結(jié)果見表8。

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