2.3.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

稱取樣品粉末1.0 g，按“2.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，室溫放置，分別于0、2、4、6、8、13、24 h進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果顯示染料木素、芒柄花素的RSD分別為1.02%、0.86%，表明樣品在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.7 重復(fù)性試驗(yàn)

精密稱取同一樣品6份，每份1.0 g，按“2.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，結(jié)果顯示染料木素、芒柄花素的RSD分別為1.61%、0.76%，表明本方法重復(fù)性良好。

2.3.8 加樣回收率實(shí)驗(yàn)

取已知含量的樣品粉末6份，每份0.5 g，精密稱定，分別加入染料木素、芒柄花素的對(duì)照品0.012 mg，按“2.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果詳見表4。
2.3.9 樣品中芒柄花素、染料木素的含量測(cè)定
取樣品雞血藤粉末1 g，精密稱定，每批藥材平行3份，按“2.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液并測(cè)定，計(jì)算含量。結(jié)果見表3及圖2。

由表3和圖2可看出，除了從化居群1、2和4環(huán)樣品，其他樣品的醇溶性浸出物含量均能達(dá)到《中國藥典》的規(guī)定（不低于8%）。梅州和從化居群的醇溶性浸出物都在3環(huán)達(dá)到峰值，變化趨勢(shì)在4環(huán)之前基本一致，4環(huán)之后含量變化趨勢(shì)不一致；惠州居群由于采樣的限制，只采集到3、4、7、8和9環(huán)的樣品，采樣的環(huán)數(shù)不連續(xù)，故無法從1環(huán)開始分析其結(jié)果，但可看出3環(huán)到4環(huán)呈增加的趨勢(shì)，7環(huán)以上的樣品中醇溶性浸出物的含量基本保持穩(wěn)定。同一植株具有不同的樹脂環(huán)紋數(shù)的原兒茶酸含量差異較大，且不同居群樣品中的變化趨勢(shì)不一致。雞血藤中兒茶素與表兒茶素的含量較高，不同樹脂環(huán)紋數(shù)藥材中的含量變化較為明顯，二者的變化趨勢(shì)基本一致，但不同居群樣品中的變化趨勢(shì)則不相同。芒柄花素與染料木素的含量變化差異較小，且具有較為一致的變化趨勢(shì)（先下降再上升，幅度較?。?，二者的含量在不同居群來源樣品中的變化趨勢(shì)亦較為一致。

2.4 相關(guān)性分析

采用SPSS對(duì)環(huán)紋數(shù)與醇溶性浸出物及5個(gè)化學(xué)組分含量的數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，由于芒柄花素?cái)?shù)據(jù)不符合正態(tài)分布，故采用Spearman雙變量相關(guān)性分析，相關(guān)系數(shù)見表5。

由表5可知，環(huán)紋數(shù)與醇溶性浸出物及5個(gè)化學(xué)成分的相關(guān)性均不顯著。其中醇溶性浸出物含量與染料木素含量具有顯著相關(guān)性，與芒柄花素含量具有極顯著相關(guān)性；表兒茶素含量與兒茶素含量具有非常顯著相關(guān)性，與芒柄花素具有顯著相關(guān)性；染料木素與芒柄花素具有非常顯著相關(guān)性。

結(jié)合含量測(cè)定結(jié)果與實(shí)地調(diào)查綜合分析發(fā)現(xiàn)，雞血藤環(huán)紋數(shù)與醇溶性浸出物及5個(gè)化學(xué)成分均無顯著相關(guān)性，3環(huán)以上的樹脂環(huán)中，芒柄花素、染料木素在植株中變化較小，而兒茶素、表兒茶素、醇溶性浸出物均較高，故3個(gè)樹脂環(huán)以上的雞血藤質(zhì)量較好。

2.5 同一條藤莖不同樹脂環(huán)紋數(shù)部位的雞血藤HPLC指紋圖譜研究

2.5.1 色譜條件

乙腈（A)～0.1%醋酸水溶液（B），梯度洗脫：0～25 min,10%～15%A;25～55 min,15%～25%A;55～95 min,25%～45%A;95～120 min,45%～70%A;120～130 min,70%～90%A;130～140 min,90%～100%A。柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10μL；流速：1 m L·min-1；運(yùn)行時(shí)間140 min；檢測(cè)波長：260 nm。

2.5.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取對(duì)照品原兒茶酸2.99 mg，芒柄花素2.10 mg，大豆苷元2.25 mg，兒茶素2.24 mg，染料木素2.46 mg，毛蕊異黃酮2.68 mg，表兒茶素2.37 mg，異甘草素1.09 mg，分別用甲醇定容于5 m L量瓶中，搖勻，作為貯備液。分別取原兒茶酸、芒柄花素、大豆苷元、兒茶素、染料木素、毛蕊異黃酮、表兒茶素及異甘草素對(duì)照品貯備液0.5 m L置10 m L量瓶中混合，用甲醇定容，搖勻，作為混合對(duì)照品溶液。對(duì)照品色譜圖見圖4。

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相關(guān)鏈接：芒柄花素，大豆苷元，兒茶素