2.6 主成分分析

為了進(jìn)一步綜合分析芭蕉同植株不同部位中羽扇豆酮和豆甾醇含量的差異性，本研究對(duì)9批芭蕉藥材的根莖、莖和葉中上述2種成分含量進(jìn)行了主成分分析。將標(biāo)準(zhǔn)化處理后的樣品數(shù)據(jù)導(dǎo)入SIMCA 14.0軟件中，得到2個(gè)特征主成分PC1、PC2。從方差累計(jì)貢獻(xiàn)率來(lái)看，建立的模型累計(jì)解釋能力參數(shù)R2X和預(yù)測(cè)能力參數(shù)Q2分別為0.999、0.998，說(shuō)明該模型的區(qū)分能力和預(yù)測(cè)能力都較好，所以前2個(gè)主成分已基本能反映芭蕉根莖、莖和葉中2種成分含量的主要特征。

以主成分建立坐標(biāo)系，得到9批芭蕉藥材根莖、莖和葉的主成分得分圖（圖2）、載荷圖（圖3）。由圖2、圖3可知，主成分得分圖的4個(gè)象限可以將樣品明顯區(qū)分開(kāi)；載荷圖中芭蕉藥材中羽扇豆酮和豆甾醇的分布情況與得分圖中樣本點(diǎn)的分布和位置對(duì)應(yīng)。結(jié)果表明，同植株芭蕉根莖、莖、葉中羽扇豆酮和豆甾醇含量具有一定的差異。

2.7 聚類分析

采用Ward聚類法對(duì)“2.5”項(xiàng)下提取的主成分進(jìn)行聚類分析，得到芭蕉同植株不同部位的分類情況，詳見(jiàn)圖4。由圖4可知，同植株不同部位的芭蕉藥材聚為3大類，其中S16（根莖）、S26（莖）、S14（莖）、S17（莖）、S8（莖）、S5（莖）、S11（莖）聚為Ⅰ類；S19（根莖）、S20（莖）、S21（葉）、S15（葉）、S18（葉）聚為Ⅱ類；S24（葉）、S6（葉）、S12（葉）、S22（根莖）、S3（葉）、S4（根莖）、S13（根莖）、S25（根莖）、S1（根莖）、S27（葉）、S2（莖）、S10（根莖）、S9（葉）、S7（根莖）、S23（莖）聚為Ⅲ類。聚類結(jié)果表明，第Ⅰ類大多為芭蕉莖部位，第Ⅱ、Ⅲ類中均有芭蕉根莖、莖和葉部位，因此芭蕉莖與其余2個(gè)部位的差異較明顯。

3 討論

現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，羽扇豆酮具有抗炎和抗糖尿病等多種生物活性；豆甾醇是一種植物甾醇，具有多種生物學(xué)活性，尤其在抗腫瘤、抗炎和抗糖尿病等方面具有潛在的藥用價(jià)值。中藥及民族藥的成分復(fù)雜，單一成分無(wú)法達(dá)到全面控制藥材質(zhì)量的目的，因此本研究建立了快速、高效且能同時(shí)檢測(cè)芭蕉藥材中羽扇豆酮和豆甾醇含量的HPLC方法，旨在為評(píng)價(jià)芭蕉藥材的質(zhì)量提供參考。

在色譜條件的考察中，筆者比較了乙腈-水、甲醇-水、甲醇-乙腈、甲醇-乙腈-水不同比例的流動(dòng)相，以及0.1、0.15、0.2 m L/min的流速對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)采用乙腈-甲醇（78.5∶21.5,V/V）作為流動(dòng)相、流速為0.15 m L/min時(shí)，羽扇豆酮和豆甾醇的峰形、分離度均較佳。同時(shí)，筆者采用全波長(zhǎng)掃描發(fā)現(xiàn)，羽扇豆酮和豆甾醇在210 nm波長(zhǎng)處均有最大吸收，故選擇210 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。此外，筆者還考察了25、30、35℃的柱溫對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在30℃時(shí)，上述2種成分的分離度較好。綜合考慮色譜峰的分離度、基線、峰形和分析時(shí)間，最終選出了本研究的色譜條件。

由9批不同產(chǎn)地芭蕉藥材不同部位（根莖、莖、葉）共27份樣品中羽扇豆酮和豆甾醇的含量測(cè)定結(jié)果可知，同植株芭蕉藥材莖中上述2種成分的含量大多較其根莖和葉中含量高。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，芭蕉根莖、莖和葉中羽扇豆酮和豆甾醇的含量差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；主成分分析結(jié)果表明，同植株芭蕉根莖、莖和葉中上述2種成分的含量具有差異；聚類分析將芭蕉根莖、莖和葉分為3大類，其中以芭蕉莖與其余2個(gè)部位的差異較明顯。導(dǎo)致這一差異的原因可能與植物的遺傳以及體內(nèi)代謝成分的積累、分布、儲(chǔ)藏等因素相關(guān)。

綜上所述，本文所建的UPLC法簡(jiǎn)單、快捷、專屬性強(qiáng)、重復(fù)性好、準(zhǔn)確性高，可用于芭蕉藥材不同部位中羽扇豆酮和豆甾醇的含量測(cè)定；芭蕉莖可替代芭蕉根莖作為羽扇豆酮和豆甾醇的原藥材來(lái)源。

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