北方偉業(yè)計量集團有限公司
以多酚含量為指標(biāo),利用Design-Expert8.0.6.1軟件對表2中的實驗結(jié)果進行分析,得到多酚含量回歸方程為:W=10.56+0.85A+1.62B-2.60C+0.24AB-0.18AC+0.43BC-0.77A2-0.90B2-1.17C2。對回歸方程進行方差分析,結(jié)果見表3??梢娪绊懨⒐~多酚含量的因素順序為:乙醇濃度>浸提溫度>料液比,整體模型達(dá)到了極顯著水平(P<0.01),模型相關(guān)系數(shù)R2=0.9676說明試驗?zāi)P偷念A(yù)測值接近實際值,回歸方程可靠性高。失擬項不顯著(P>0.05),變異系數(shù)7.31%(<10%),說明模型具有較好的試驗穩(wěn)定性。兩因素間的交互作用對響應(yīng)值的影響可用等高線圖和響應(yīng)面圖表示,結(jié)果見圖5~圖7。
由圖5可見,浸提溫度的變化曲面較陡,表明浸提溫度比料液比對芒果葉多酚含量影響大。
圖6顯示,在乙醇濃度接近10%,浸提溫度接近80℃時芒果葉多酚含量接近最大值,乙醇濃度的影響大于浸提溫度。圖7中當(dāng)乙醇濃度接近10%,料液比接近1:40時芒果葉多酚含量接近最大值,乙醇濃度的影響大于料液比,與回歸方程得到的結(jié)果一致。
3、工藝條件優(yōu)化及驗證試驗
由Design-Expert8.0.6.1軟件得到優(yōu)化后的工藝參數(shù)為:料液比1:37.85,浸提溫度76.48℃,乙醇濃度10%,考慮實際操作,確定最佳工藝條件為浸提時間1.5h,料液比1:38,浸提溫度76℃,乙醇濃度10%。在此條件下進行3次平行驗證試驗,得芒果葉中多酚含量的平均值為13.22mg/g,相對偏差為2.94%,與模型預(yù)測值接近,說明模型預(yù)測較為準(zhǔn)確,響應(yīng)面法優(yōu)化芒果葉多酚的浸提工藝可靠。
三、結(jié)論
在單因素基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)面法對乙醇濃度、料液比、浸提溫度等因素對芒果葉中多酚含量的影響進行了優(yōu)化,回歸模型擬合良好,確定最佳提取條件為浸提時間1.5h,料液比1:38,浸提溫度76℃,乙醇濃度10%。此條件下芒果葉中多酚含量的實測值與響應(yīng)面法優(yōu)化的預(yù)測值接近。
在提取芒果葉中的多酚之前先用石油醚脫脂,是因為考察乙醇濃度對芒果葉多酚含量的影響時可見,隨著乙醇濃度的增大,提取液的顏色呈現(xiàn)出綠色,分析其原因是由于隨著乙醇濃度的增大,溶劑極性減小,芒果葉中的部分脂溶性物質(zhì)溶出對顯色產(chǎn)生了影響。實驗對比發(fā)現(xiàn),脫脂后的芒果葉中多酚提取率有所升高,因此本實驗采用石油醚脫脂后的芒果葉進行研究。
目前植物中多酚含量測定的方法有福林酚法、酒石酸亞鐵法、普魯士藍(lán)法、高錳酸鉀法等,其中酒石酸亞鐵法是利用亞鐵離子在一定pH下與提取液中的多酚物質(zhì)形成藍(lán)紫色絡(luò)合物,在540nm有最大吸收的原理進行測定,該法所用試劑廉價易得,操作簡單,重現(xiàn)性好。因此本實驗采用浸漬法對芒果葉中多酚進行提取,酒石酸亞鐵比色法測定多酚含量。
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