隨著人們對藥品安全性、質(zhì)量控制的更為嚴(yán)格的要求，人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會議（ICH）發(fā)布了《元素雜質(zhì)指南Q3D》（ICHQ3D），規(guī)定了口服、注射和吸入制劑中的24種元素雜質(zhì)的日允許暴露量（PDE）；此外，美國藥典USP41提出相應(yīng)的要求，其規(guī)定的元素種類和限量與ICHQ3D一致?；瘜W(xué)藥品中無機(jī)雜質(zhì)元素對疾病的治療沒有益處，反而會對病人的健康帶來損害，這就需要我們關(guān)注化學(xué)藥品中的無機(jī)元素雜質(zhì)。阿莫西林為廣譜青霉素類抗生素，是繼氨芐西林后市場上第二個氨基青霉素類抗菌藥物，也是最常見的抗菌藥物之一，其原料藥可以被制成多種劑型的制劑，如國內(nèi)批準(zhǔn)上市的有片、腸溶片、膠囊、干混懸劑、顆粒劑等劑型，其中以阿莫西林膠囊為主。為了加強(qiáng)阿莫西林原料藥中元素雜質(zhì)的質(zhì)量控制，需要建立相應(yīng)的雜質(zhì)元素檢測方法，特別是第1類和第2A類的砷（As）、鎘（Cd）、鉛（Pb）、汞（Hg）、釩（V）、鈷（Co）、鎳（Ni）7種雜質(zhì)元素含量的檢測方法。

目前，元素雜質(zhì)的測定方法主要有原子吸收光譜（AAS）法、原子熒光（AFS）法、電感耦合等離子體發(fā)射光譜（ICP–OES）法和電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP–MS）法。其中，AAS法和AFS法每次只能測試1個或是幾個元素，效率較低；ICP–OES法能多元素同時測定，但是檢出限較高；ICP–MS法具有靈敏度高、能夠多元素同時測定等優(yōu)點，被廣泛應(yīng)用于痕量、微量元素的測定，也是USP41推薦的方法之一。樣品前處理方法有微波消解、濕法消解、直接溶解等，微波消解和濕法消解需要消耗較多的試劑，而直接溶解法前處理簡單、快捷，試劑消耗小，能在較短的時間內(nèi)完成樣品的測試。
阿莫西林原料藥和制劑中7種雜質(zhì)元素的檢測方法尚未見報道，筆者以阿莫西林原料藥為研究對象，建立了用2%硝酸直接溶解稀釋樣品，ICP–MS測定阿莫西林原料藥中V、Co、Ni、As、Cd、Pb、Hg7種雜質(zhì)元素含量的方法。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

電感耦合等離子體質(zhì)譜儀：Agilent7700x型，美國安捷倫科技有限公司。電子分析天平：NBL214e型，感量為0.1mg，艾德姆衡器（武漢）有限公司。多元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（含V、Co、Ni、As、Cd、Pb等24種元素）：100μg/mL，編號為GSB04–1767–2004，國家有色金屬及電子材料分析測試中心。鍺標(biāo)準(zhǔn)溶液：1000μg/mL，編號為GSB04–1728–2004，國家有色金屬及電子材料分析測試中心。汞標(biāo)準(zhǔn)溶液：1000μg/mL，編號為GSBG62069–90，國家鋼鐵材料測試中心。錸標(biāo)準(zhǔn)溶液：1000μg/mL，編號為GSBG62064–90，國家鋼鐵材料測試中心。銦標(biāo)準(zhǔn)溶液：1000μg/mL，編號為GSB04–1731–2004，國家鋼鐵材料測試中心。ICP–MS調(diào)諧溶液：Ce、Co、Li、Tl、Y質(zhì)量濃度均為10μg/mL，美國安捷倫科技有限公司。濃硝酸：UP級，蘇州晶瑞化學(xué)股份有限公司。實驗用水為超純水（電阻率≥18.2MΩ·cm），實驗室自制。阿莫西林原料藥（3批），由某制藥企業(yè)提供。

1.2 ICP–MS儀器條件

射頻功率：1.55kW；等離子體氣：氬氣，流量為15.0L/min；輔助氣：氬氣，流量為0.8L/min；載氣：氬氣，流量為0.8L/min；稀釋氣：氬氣，流量為0.35L/min；碰撞氣：氦氣，流量為4.3mL/min；采樣深度：10mm；霧化室溫度：2℃；內(nèi)標(biāo)元素通過T型三通管在線引入；監(jiān)測同位素：⁵¹V、⁵⁹Co、⁶⁰Ni、⁷⁵As、¹¹¹Cd、²⁰⁸Pb、²⁰²Hg、⁷2Ge、¹¹⁵In、¹⁸5Re。

1.3 實驗步驟

1.3.1樣品處理

在50mL的比色管中，加入阿莫西林原料藥0.25g，用2%硝酸溶解，并定容至50mL。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

V、Co、Ni、As、Cd、Pb系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液1：取多元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2%硝酸溶液逐級稀釋，各元素的質(zhì)量濃度均分別為0、0.5、1、5、10、50、100、200μg/L。

Hg系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液2：取汞標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2%硝酸溶液逐級稀釋，Hg的質(zhì)量濃度為0、0.5、1、2、5、10μg/L（臨用現(xiàn)配）。

Ge、In、Re混合內(nèi)標(biāo)溶液：取Ge、In、Re標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2%硝酸稀釋成各元素質(zhì)量濃度均為0.5mg/L的混合內(nèi)標(biāo)溶液。

1.3.3 定量分析方法

ICP–MS儀器點火穩(wěn)定后，采用ICP–MS調(diào)諧溶液保證狀態(tài)滿足使用要求，依次分析標(biāo)準(zhǔn)溶液、空白溶液、樣品溶液。采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法對樣品溶液中的元素進(jìn)行定量。

2 結(jié)果與討論

2.1 儀器工作條件的選擇

儀器配有八極桿碰撞–反應(yīng)池，比較了采用He作為碰撞氣體（He模式）和不采用碰撞氣體（NOGas模式）2種工作模式，發(fā)現(xiàn)采用He模式能夠明顯的去除多原子離子對待測元素的干擾，如³⁵Cl¹6O⁺對⁵1V⁺、³⁵Cl⁴⁰Ar⁺對⁷⁵As⁺的干擾，所以采用He模式，優(yōu)化后的He流量為4.3mL/min。

采用了直接稀酸溶解制備樣品溶液的前處理方法，樣品溶液中有機(jī)物含量為0.5%，為了減少在等離子體接口的采樣錐處產(chǎn)生積碳，開啟并優(yōu)化了在線稀釋氣體的流量，最終優(yōu)化后稀釋氣體流量為0.35L/min。

2.2 樣品處理方法的選擇

ICP–MS測定元素雜質(zhì)時，根據(jù)樣品的性質(zhì)，可采用直接進(jìn)樣分析、溶劑溶解分析和消解后分析。采用2%硝酸作為溶劑溶解和采用濃硝酸微波消解均能將阿莫西林樣品處理為無色透明的溶液，但是前者的操作更簡便，硝酸的使用量少，酸及其處理過程帶來的空白污染問題少，所以采用2%硝酸作為溶劑溶解樣品的方法來制備樣品溶液。

2.3 樣品處理方法的優(yōu)化

比較了取樣量分別為1、0.5、0.25g，定容體積為50mL時，不同取樣量對內(nèi)標(biāo)響應(yīng)的影響。當(dāng)取樣質(zhì)量為1g時，Ge、In、Re三個內(nèi)標(biāo)元素的回收率均為150%，取樣質(zhì)量為0.5g和0.25g時，內(nèi)標(biāo)回收率在100%～120%之間，表明溶液中阿莫西林含量高時，內(nèi)標(biāo)元素的響應(yīng)增強(qiáng)了，取樣質(zhì)量為0.5g或0.25g較合適。

在上述3種取樣量的條件下，配制了最終溶液質(zhì)量濃度為10μg/L的V、Co、Ni、As、Cd、Pb和Hg的加標(biāo)溶液，結(jié)果表明取樣質(zhì)量分別為1、0.5、0.25g時，As的回收率分別約為260%、160%、130%，其它元素回收率在80%～120%之間。不同取樣質(zhì)量，主要是對As的測試結(jié)果產(chǎn)生影響，這是因為As的電離能較高，樣品中的有機(jī)成分增加了其在等離子體中的電離。

綜上，選擇樣品處理方法的取樣質(zhì)量為0.25g，定容體積為50mL。

相關(guān)鏈接：青霉素，硝酸，阿莫西林，氬氣

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