煙草青枯病是由青枯雷爾氏菌引起的土傳細(xì)菌性維管束病害，該病害易感染、傳播快、毀滅性強(qiáng)。煙草青枯病-般在煙草生長(zhǎng)后期發(fā)生，發(fā)病后煙葉產(chǎn)量顯著降低，烤后煙葉青雜煙、光滑煙較多，化學(xué)成分不協(xié)調(diào)，嚴(yán)重影響煙草的品質(zhì)，可用性明顯下降。截至目前，青枯病已成為熱帶、亞熱帶地區(qū)煙田的主要病害。在我國(guó)，以云南、福建、廣東、四川、貴州等南方煙區(qū)發(fā)病較為嚴(yán)重，某些年份甚至造成毀滅性損失，如：云南文山、臨滄和保山等地。近年來(lái)，青枯病正在逐漸向北方煙區(qū)蔓延，在山東、河南、遼寧等煙區(qū)均已報(bào)道。

青枯病的防治主要有農(nóng)業(yè)、化學(xué)和生物防治等措施，但均不能有效預(yù)防青枯病的發(fā)生與蔓延，且各種防治措施都存在不足及局限性，比如在生產(chǎn)中大量使用農(nóng)藥對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重破壞等。因此明確煙草青枯病抗性的遺傳規(guī)律，選育抗青枯病品種，是目前青枯病防治最基本、最有效、最經(jīng)濟(jì)的防治措施。

選育抗病品種，首先要有良好的抗源并分析其遺傳規(guī)律。目前青枯病抗源來(lái)源十分狹窄，國(guó)內(nèi)煙草青枯病的抗源主要是從普通煙草品種T1448A選育而來(lái)，由其育成的DBl01及其衍生的Cokerl39、NC95和Coker319是抗青枯病育種的主體親本。本研究前期通過(guò)EMS技術(shù)誘變翠碧-號(hào)(CB-1)獲得抗青枯病突變體材料153-K，將該突變體在溫室和田間病圃進(jìn)行青枯病鑒定，153-K均表現(xiàn)為高抗。因此，本研究利用153-K構(gòu)建CB.1×153.K組合，并通過(guò)P1、P2、F1和F2多世代聯(lián)合分析，探究153.K抗性基因的遺傳規(guī)律，以期為培育優(yōu)質(zhì)的抗青枯病新品種提供理論基礎(chǔ)，提高育種效率。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料：抗青枯病突變體153-K由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院煙草研究所生物技術(shù)研究中心利用EMS誘變CB-1獲得。以CB.1為父本，突變體153-K為母本，雜交獲得F1代，F(xiàn)1自交獲得F2群體。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于2020年在安徽省宣城市寒亭鎮(zhèn)和福建省福州市宦溪鎮(zhèn)兩個(gè)病圃進(jìn)行。田間種植行距1.2m，株距0.5m。P1，P2，F(xiàn)1隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，重復(fù)3次，每重復(fù)10株。安徽F2群體調(diào)查205株，福建F2群體調(diào)查165株。

1.3 農(nóng)藝性狀調(diào)查

按照煙草病蟲害分級(jí)及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的調(diào)查方法(YCT39-1996)，以株為單位調(diào)查發(fā)病情況，并計(jì)算病情指數(shù)。
參照標(biāo)準(zhǔn)YC/T142-2010《煙草農(nóng)藝性狀調(diào)查測(cè)量方法》和文獻(xiàn)中所列方法對(duì)F2群體進(jìn)行主要農(nóng)藝性狀調(diào)查，調(diào)查性狀為株高、莖圍、節(jié)距、葉片數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用MicrosoRExcel和SPSS20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理、統(tǒng)計(jì)分析與相關(guān)分析。采用卡方檢驗(yàn)和植物數(shù)量性狀“主基因+多基因”混合遺傳模型分析方法進(jìn)行遺傳分析。

2 結(jié)果

2.1 153.K抗病性遺傳規(guī)律分析

2.1.1 病圃青枯病發(fā)病情

況安徽Pl(CB.1)的病情指數(shù)為83.33，P2(153.K)的病情指數(shù)為22.22；福建P1(CB-1)的病情指數(shù)為84.79，P2(153.K)的病情指數(shù)為31.58。在安徽、福建兩個(gè)病圃環(huán)境下P1(CB-1)對(duì)青枯病均表現(xiàn)為高感，突變體P2(153.K)對(duì)青枯病均表現(xiàn)為高抗。安徽Fl(CB.1×153.K)病情指數(shù)為90.65。福建F1(CB.1×153.K)的病情指數(shù)為90.64，且沒(méi)有完全抗青枯病植株的存在，這表明青枯病抗性為隱性遺傳。通過(guò)SPSS20.0軟件對(duì)F2代各病級(jí)株數(shù)進(jìn)行正態(tài)分布分析(卡方檢驗(yàn))，發(fā)現(xiàn)直方圖中頻率分布有明顯的波峰，且偏度約等于0，說(shuō)明F2代各病級(jí)株數(shù)呈正態(tài)分布；Q.Q圖檢驗(yàn)看出各病級(jí)的頻數(shù)基本分布在直線附近，進(jìn)-步說(shuō)明F2代各病級(jí)株數(shù)服從正態(tài)分布(圖1、2)。該結(jié)果表明兩個(gè)環(huán)境下的F2代均存在一定性狀分離，可以進(jìn)行遺傳規(guī)律的分析。

2.1.2 主基因+多基因混合模型遺傳規(guī)律

利用P1、P2、F1和F2四個(gè)世代，對(duì)安徽、福建兩個(gè)環(huán)境下的煙草抗青枯病突變體153-K的抗青枯病數(shù)量性狀進(jìn)行“主基因+多基因”混合遺傳分析，得到兩個(gè)環(huán)境下的24種模型的AIC值、極大似然值(表1)，根據(jù)AIC值最小原則選擇最優(yōu)模型。在安徽CB-1×153-K組合中，AIC值較低的有MX2-EEAD-AD、MX2-A—AD、MX2-AD.AD和2MG.EEAD；在福建CB-1×153.K組合中，AIC值較小的模型有MX2-ADI-AD和MX2.ADI—ADI，將以上模型作為兩個(gè)環(huán)境下的備選模型。

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