二型糖尿病（Ｔ2DM）是一種復(fù)雜的慢性代謝紊亂疾病，其特征是因胰島素抵抗的進(jìn)一步發(fā)展和胰島素效率降低導(dǎo)致的胰島素相對(duì)或絕對(duì)缺乏而引起高血糖癥狀。Ｔ2DM已成為全球公共衛(wèi)生面臨的一大挑戰(zhàn)，據(jù)國(guó)際糖尿病聯(lián)合會(huì)（IDF）估計(jì)，2017年有超過(guò)4.25億人患有糖尿病，到2045年這一數(shù)字預(yù)計(jì)將增加到6.29億人。很多科學(xué)家都在尋找合適的藥物或者通過(guò)膳食干預(yù)來(lái)降低二型糖尿病對(duì)人體健康的影響。在1922年發(fā)現(xiàn)胰島素之前，糖尿病的治療主要是通過(guò)飲食控制和植物療法。如今，人們普遍認(rèn)為植物性食品具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，其中超過(guò)400種植物被用于糖尿病的治療。流行病學(xué)研究表明，谷類食物可以降低二型糖尿病的發(fā)展。

作為粟類代表的小米，由于其種植地域的限制，對(duì)其研究也受到一定程度的限制。早在《神農(nóng)本草》中就記載其具有消渴的功效。國(guó)內(nèi)外的一些研究也指出其具有潛在的健康功效。人群實(shí)驗(yàn)表明，小米膳食可以顯著降低糖耐量減低受試者的空腹血糖、糖耐量后2h血糖、胰島素抵抗指數(shù)和肥胖程度。小米的膳食纖維含量是大米的2～10倍，并含有一定量的抗性淀粉，能夠改善餐后血糖反應(yīng)，避免應(yīng)激性低血糖。小米中還富含多酚物質(zhì)（0.30%～3.00%），有較強(qiáng)的抗氧化作用。然而，關(guān)于小米多酚的降糖效果存在爭(zhēng)議。有研究表明小米多酚可顯著促進(jìn)脂肪分解，降低胰島素及瘦素，達(dá)到降糖的效果；也有研究認(rèn)為小米多酚對(duì)α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性不及高粱等其它雜糧，無(wú)法調(diào)節(jié)餐后血糖。然而，目前的研究均未明確解析小米的降糖成分。此外，小米作為糧食作物，加工方式也決定了其營(yíng)養(yǎng)特性。加熱為最常見(jiàn)的處理方式，加熱過(guò)程可破壞小米中熱敏性物質(zhì)，使淀粉糊化及蛋白變性。通過(guò)對(duì)生、熟小米提取物的功效比較可以更好地了解其降糖組分的性質(zhì)。

針對(duì)上述情況，本試驗(yàn)系統(tǒng)分析了生、熟小米70%乙醇提取物對(duì)SＴZ誘導(dǎo)的SD大鼠糖脂代謝的影響。依次用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、水4種不同極性溶劑萃取生、熟小米70%乙醇提取物，比較其抗氧化及α-淀粉酶抑制作用，從而初步判定小米的活性組分。本試驗(yàn)結(jié)果可為小米的生物功能研究提供借鑒。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

8周齡雄性SD大鼠（動(dòng)物合格證號(hào)：11400700149680），購(gòu)至北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司（SCXK（京）2012-0001）。

1.1.2試劑

以山西東方亮小米為研究對(duì)象，淀粉（68.2%）、蛋白（11.0%）、脂肪（6.7%）、總膳食纖維（2.04%）、維生素E（6.58mg/kg）、阿魏酸（15.6μg/100g）。STZ，美國(guó)Sigma公司；其它試劑均為分析純。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1樣品提取

小米與水比例為1∶1.6（小米500g，加入800mL水），用電飯鍋蒸20min，燜10min。50℃，12h左右烘干，過(guò)80目篩。此時(shí)糊化度達(dá)85%以上。

生、熟小米500g，打粉機(jī)每30s停歇1次，1次10min，防止打粉機(jī)過(guò)熱，過(guò)80目篩。料液比1∶10（小米∶70%乙醇），超聲5s，停5s共30次破碎。在50℃旋渦提取2h。抽濾后將上清減壓蒸餾并冷凍干燥，得生小米70%乙醇粗提取物（UMC）、熟小米70%乙醇粗提取物（M-C），于-80℃保存。

將生、熟小米70%乙醇粗提物（UM-C、M-C）溶解在水中，加入與水等體積的正己烷，常溫萃取3次，合并上相萃取液并減壓濃縮，得生、熟正己烷相粗提物（UM-HX、M-HX）；下相依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，合并萃取液并減壓濃縮，得乙酸乙酯相生、熟粗提物（UM-EA、M-EA），正丁醇相生、熟粗提物（UM-BＴ、M-BＴ）。有機(jī)溶劑萃取后的水相減壓濃縮，獲得水相生、熟粗提物（UM-W、MW）。將上述得到的5種粗提物冷凍干燥，氮吹過(guò)夜，于-80℃保存。

1.2.2動(dòng)物試驗(yàn)

1.2.2.1大鼠的常規(guī)飼養(yǎng)

所有SD大鼠用維持飼料適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，飼養(yǎng)環(huán)境為SPF級(jí)，晝夜對(duì)半交替，保證自由攝食及攝水。隨后隨機(jī)選取6只為正常對(duì)照組，采用10%低脂飼料喂養(yǎng)，直至試驗(yàn)結(jié)束。其余改用60%高脂飼料喂養(yǎng)，維持4周。

1.2.2.2糖尿病大鼠的制備及分組

高脂飼養(yǎng)4周后的大鼠，經(jīng)隔夜禁食后，腹腔注射35mg/kg的SＴZ溶液，繼續(xù)60%高脂飼養(yǎng)。SＴZ注射3d后，隔夜禁食，尾尖取血測(cè)空腹血糖，以空腹血糖＞10mmol/L為造模成功標(biāo)準(zhǔn)，篩選出血糖達(dá)標(biāo)的糖尿病大鼠，隨機(jī)分為模型對(duì)照組（D）、二甲雙胍陽(yáng)性對(duì)照組（Met，100mg/kgbw）、生小米70%乙醇粗提物低劑量組（UM-CL，200mg/kgbw）、熟小米70%乙醇粗提物低劑量組（M-CL，200mg/kgbw）、熟小米70%乙醇粗提物高劑量組（M-CH，400mg/kgbw）。

1.2.2.3口服糖耐量試驗(yàn)（OGTT）

大鼠禁食（不禁水）12h，各組大鼠經(jīng)口給予2.0g/kgbw葡萄糖溶液。在隨后120min內(nèi)，分別在0，30，60，120min割尾靜脈采血，血糖儀測(cè)定血糖。糖耐量曲線下面積（AUC）采用梯形法計(jì)算：

AUC曲線下面積=0.25×（0min血糖+30min血糖）+0.25×（30min血糖+60min血糖）+0.5×（60min血糖+120min血糖）                  （1）

1.2.2.4臟器系數(shù)測(cè)定

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死后，立即取臟器，濾紙吸干表面水分稱其濕重，計(jì)算臟器系數(shù)：

臟器系數(shù)=臟器質(zhì)量（g）/體重（kg）  （2）

1.2.3DPPH自由基清除能力測(cè)定

0.45mmol/LDPPH乙醇溶液與樣品溶液（0.5，1.0，2.0，4.0，8.0mg/mL）1∶1混合，室溫避光1h后，離心取上清，517nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光值。利用5～50μmol/LＴrolox制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。DPPH·清除率的計(jì)算公式為：

清除率（%）=（A₀-A₁+A₂）／A₀×100         （3）

式中：A₀—DPPH溶液3mL+無(wú)水乙醇/蒸餾水3mL的吸光度；A₁—DPPH溶液3mL+樣品溶液3mL的吸光度；A₂—樣品溶液3mL+無(wú)水乙醇3mL的吸光度。

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