一、方法選擇的依據(jù)

淀粉可直接被酸水解生成葡萄糖；或被酶水解生成麥芽糖和糊精，再經(jīng)酸水解生成葡萄糖，可測(cè)定葡萄糖含量(還原糖)再計(jì)算出淀粉含量。另外，淀粉經(jīng)分散和酸解后具有一定的旋光性，也可用旋光法測(cè)定淀粉含量。這里要指出的是，酸水解法不僅使淀粉水解，而且也能分解半纖維素，結(jié)果產(chǎn)生了具有還原力的木糖、阿拉伯糖等單糖，使淀粉測(cè)定結(jié)果偏高。

有人曾以鼓皮、小米殼、玉米及甘薯等試樣用糖化酶法及直接酸水解法測(cè)定淀粉含最，結(jié)果糖化酶法均較直接水解法為低，因?yàn)橹苯铀崴夥ㄖ械矸叟c半纖維家均被水解為還原糖，而糖化酶法僅能糖化淀粉，半纖維索則不起作用，因此半纖維素留于濾渣中，將糖化后的濾液與濾渣分別水解后滴定糖，二者結(jié)果之和與直接酸水解法滴定糖的結(jié)果相接近。用直接酸水解法測(cè)定淀粉，易將半纖維素誤作淀粉，以致得出錯(cuò)誤的結(jié)果。本節(jié)除介紹經(jīng)典的酶水解法外，還推薦谷物種子粗淀粉測(cè)定的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法—旋光法。

二、谷物種子中粗淀粉的測(cè)定(CaC12-HOAc浸提-旋光法)

1、方法原理淀粉是多糖聚合物，可用CaC12-HOAc(相對(duì)密度1.3,pH2.3)為分散和液化劑，在一定的酸度和加熱條件下，使淀粉溶解和部分酸解，生成具有一定旋光性的水解產(chǎn)物可用旋光計(jì)測(cè)定。用此法時(shí)，各種淀粉的水解產(chǎn)物的比旋指定為203。全國(guó)谷物淀粉分析方法標(biāo)準(zhǔn)化研究協(xié)作組認(rèn)為，本法結(jié)果的重復(fù)性好，操作簡(jiǎn)便、快速。

2、儀器及設(shè)備旋光計(jì)：電熱恒溫甘油浴(±1°C)。

3、試劑

（1） CaCl2-HOAc溶液：溶解5份重的CaC12•2H2O(分析純)于6份水中，調(diào)節(jié)其相對(duì)密度(20℃時(shí))為1.30。此溶液約含CaC12330g•L-1。再向此溶液中加入冰HOAc(每1000mL約加1.3mL冰HOAc)，用pH計(jì)測(cè)試調(diào)節(jié)至pH2.3，過(guò)濾至清澈為止。

（2）硫酸鋅溶液：稱取ZnSO4•7H2O 30g溶于100 mL水中。

（3）亞鐵氰化鉀溶液：稱亞鐵氰化鉀(K4Fe (CN )6•3H2O，分析純)15g溶于100 mL水中。

4、操作步驟

（1）待測(cè)液制備稱取磨細(xì)谷物樣品2.500g，放入250 mL三角瓶中(同時(shí)測(cè)定水分)，加入CaCl2-HOAc溶液10mL和6個(gè)～8個(gè)小玻璃球或大粒石英砂，輕輕搖勻，不要讓樣品粘在瓶底。再用CaC12-HOAc溶液50mL沿瓶壁淋洗附著在瓶壁上的樣品，蓋上小漏斗，放在1180±10C恒溫油浴中，使之在5 min內(nèi)達(dá)到恒溫，繼續(xù)恒溫加熱25 min。在加熱過(guò)程中不要攪拌，使其自然分散水解(可用玻棒將瓶壁附著物推至液面以下)。煮畢立即取出，置于流水冷卻槽中充分冷卻(約15min)，然后用30mL左右水分次無(wú)損地沖洗全部?jī)?nèi)容物轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，加入硫酸鋅溶液1mL，充分搖勻后再加入亞鐵氛化鉀溶液1mL，再搖勻，如有泡沫，可加幾滴乙醇消除之，用水定溶，用中速濾紙過(guò)濾，棄去初濾液(15mL±20mL)。取澄清液待測(cè)。

（2）測(cè)定：測(cè)定先用清亮的待測(cè)液洗旋光管2次～3次，然后將溶液裝滿管中，使管口液體呈一凸起，將活動(dòng)的圓玻璃片與旋光管垂直方向插入蓋上(可避免留有氣泡)。將管蓋扭緊，檢查管中是否有氣泡。然后測(cè)讀旋光儀上的旋光度或檢糖計(jì)上的0S,取3次測(cè)讀的平均數(shù)。

5、結(jié)果計(jì)算

式中：

     α---旋光角度的讀數(shù)；  

     L---旋光管長(zhǎng)(dm)；  

    m---樣品質(zhì)量(g)；  

     203---淀粉的比旋；

        H---樣品水分含量，%。

6、注意事項(xiàng)

（1） CaC12-HOAc溶液的酸度必須調(diào)節(jié)至pH2.3(用酸度計(jì)調(diào)試)，若pH＞2.5，易使分散液粘稠，難于過(guò)濾；若pH＜2.5，易引起淀粉進(jìn)一步水解而降低比旋。

（2）樣品中含有水溶性糖類，須先用80%乙醇洗糖，但絕大多數(shù)谷物種子中水溶性糖含量甚微，一般可忽略不計(jì)，不必進(jìn)行脫糖手續(xù)。

（3） CaC12-HOAc溶液應(yīng)在放入甘油浴前約5mi。加入，以防樣品枯附在瓶底，影響分散效果

（4）試驗(yàn)證明，在加熱初期攪拌，淀粉易結(jié)塊；但在放入甘油浴前必須輕輕搖動(dòng)，使樣品均勻分散在CaC12-HOAc介質(zhì)中，勿使樣品粘在瓶底，必要時(shí)可用鏟形玻棒將其攪開，加熱后使其自然水解，測(cè)定結(jié)果的重復(fù)性較好。

三、麩皮、小米殼、玉米、甘薯、草本植物(牧草等)的莖葉中淀粉的測(cè)定(淀粉糖化酶一酸水解法)

1、方法原理淀粉先經(jīng)淀粉酶水解成麥芽糖及糊精，再經(jīng)酸水解，最后成葡萄糖。測(cè)定所得到的葡萄糖量，就可計(jì)算淀粉含量。

2、儀器及設(shè)備恒溫箱(保溫60℃以下孵化器。

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